Encyclopedia of Experiments: Biology
É necessário ter uma assinatura JoVE para assistir este Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Snabb en vuxen fisk i 24 timmar före injektion för att tömma mag-tarmkanalen och skapa ytterligare utrymme i buken.
Därefter pipett önskad mängd injektionslösning på en bit laboratoriefilm och dra den i en insulinnål. Placera nålen mellan bäckenfenorna i 45 graders vinkel från den främre bakre kroppsaxeln och tryck försiktigt in den i mittlinjen. För in nålen cirka 1 till 2 millimeter i bukhålan, utrymmet mellan bukväggen och inre organ, och injicera långsamt lösningen av intresse. Vänta i fem sekunder innan du drar ut nålen för att undvika spill.
Efter injektionen, överför snabbt fisken till en återhämtningstank som innehåller färskt tankvatten.
- Rör först ut ur 5 mikroliterdroppar av den utspädda bakterielösningen på en bit paraffinfilm.
Placera dessa fiskar ventrala sida upp i slitsarna på en bit fukt skummad plast. Injicera sedan insulinnålen mellan bäckenfenorna i 45 graders vinkel.
Ta prover från bakteriell alikvot som används var 15:e minut på 7H10-plattor. Inkubera dessa prover vid 29 grader Celsius i fem dagar för att verifiera infektionsdosen. Kontrollera fiskens välbefinnande regelbundet, se till att avliva någon fisk med infektionssymtom genom att inkubera dem i vatten med mer än 0,02% av 3-aminobensosyraetylester.
