Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Ayunar un pez adulto durante 24 horas antes de la inyección para vaciar el tracto gastrointestinal y crear espacio adicional en el abdomen. El día del procedimiento, anestesiar el pescado con tricarina y colocarlo en una ranura en una esponja húmeda con el lado ventral hacia arriba.
A continuación, pipetear la cantidad deseada de solución inyectable en una pieza de película de laboratorio y tirar de ella en una aguja de insulina. Coloque la aguja entre las aletas pélvicas en un ángulo de 45 grados desde el eje del cuerpo anterior-posterior y empújela suavemente en la línea media. Avance la aguja aproximadamente 1 a 2 milímetros en la cavidad abdominal, el espacio entre la pared abdominal y los órganos internos, e inyecte lentamente la solución de interés. Espere cinco segundos antes de sacar la aguja para evitar cualquier derrame.
Después de la inyección, transfiera rápidamente el pescado a un tanque de recuperación que contenga agua dulce del tanque. Si el pez no comienza a nadar inmediatamente, arremolina el agua cerca de las branquias para ayudarla a recuperarse de la anestesia.
- Primero, canaliza de 5 gotas de microlitro de la solución bacteriana diluida en un pedazo de película de parafina.
Coloque estos peces ventrales hacia arriba en las hendiduras de un pedazo de plástico espumado húmedo. Inyecte la aguja de insulina entre las aletas pélvicas en un ángulo de 45 grados. Mantenga la abertura de la aguja hacia arriba para asegurarse de que toda la abertura está dentro de la cavidad abdominal.
Tome muestras de la alícuota bacteriana en uso cada 15 minutos en placas 7H10. Incuba estas muestras a 29 grados Celsius durante cinco días para verificar la dosis de infección.
