腹腔内注射：将溶液输送到成年斑马鱼腹腔的方法

- 在注射前将成年鱼禁食24小时，以排空胃肠道，并在腹部创造额外的空间。在手术当天，用三角鱼麻醉鱼，并将其放入湿海绵中的槽中，腹侧朝上。

接下来，将所需的注射液输送到一块实验室膜上，并将其拉入胰岛素针中。 将针头从前后身体轴以45 度角放置在骨盆鳍之间，然后轻轻地将其推入中线。 将针头推进到腹腔、腹壁和内脏之间的空间中，慢慢注入兴趣溶液。等待五秒钟，然后拔出针头以避免任何溢出。 现在，小心地取出针头。

注射后，迅速将鱼转移到含有新鲜水箱的回收罐中。如果鱼不立即开始游泳，在刺附近旋转水以帮助它从麻醉中恢复过来。 在示例协议中，我们将向 RAG1 突变鱼中注入一种分枝杆菌马里纳姆溶液，以研究感染。

-首先，将稀释细菌溶液的5微升液滴输送到一块石蜡膜上，然后将液滴拉入30个量表胰岛素针头。使用5至8个月大的鱼进行这项实验，其中一条是野生鱼，另一条是RAG突变鱼。

将这些鱼的腹侧放在一块潮湿的发泡塑料的缝隙中。在骨盆鳍之间以45度角注射胰岛素针。保持针头向上打开，以确保整个开口位于腹腔内。然后，慢慢注射细菌溶液。在此之后，小心地取出针头，并立即将鱼转移到装满淡水的回收罐中。

从7H10板块上每15分钟使用一次细菌碱性报价取样。在29摄氏度下孵化这些样本5天，以验证感染剂量。定期检查鱼的福祉，确保通过在水中孵化出超过0.02%的3-氨基苯甲酸乙酯来安乐死任何有感染症状的鱼类。