腹腔内注射:成体ゼブラフィッシュの腹腔への溶液送達方法

- 注射前に24時間成魚を速くして胃腸管を空にし、腹部にスペースを作る。処置の日に、トリセインで魚を麻酔し、腹側を上に向けた濡れたスポンジのスロットに入れる。

次に、所望の量の注射液を実験室フィルムにピペットし、それをインスリン針に引き込む。 骨盤のフィンの間に前部後部の体軸から45度の角度で針を置き、中線でそっと押し込みます。

注射後、すぐに新鮮なタンク水を含む回収槽に魚を移す。魚がすぐに泳ぎ始めなければ、エラの近くの水を渦巻いて麻酔から回復するのを助ける。例のプロトコルでは、感染を研究するためにMYCOBACTERマリナム溶液をRAG1変異魚に注入する。

- まず、希釈した細菌溶液の5マイクロリットルの液滴からパラフィンフィルムにパイプアウトし、その後、30ゲージのインスリン針に液滴を引き込み、この実験には5〜8ヶ月の魚を使用し、1つは野生型の魚で、もう1つはRAG変異魚です。

湿った発泡プラスチックの破片のスリットにこれらの魚の腹側を置く。骨盤ひれの間にインスリン針を45度の角度で注入し、針を上向きに開いて、開口部全体が腹腔内にあることを確認します。

7H10プレートで15分ごとに使用されている細菌アリコートからサンプルを採取し、これらのサンプルを摂氏29度で5日間インキュベートして感染量を確認してください。