Controlled Cervical Laceration Verletzungen in Mäuse

1. Tier Vorbereitung und Anwendung des Spine Stabilizer Die Maus Halswirbelsäule konkaven ventral als aus der Seitenansicht zu sehen. Die Dornfortsätze von C3 bis T1 sind klein und spröde und sind daher nicht für den vertebralen Stabilisierung geeignet, wie sie üblicherweise 3,4 beschrieben. Wir empfehlen, dass Wirbelsäule Stabilisierung durch lateralen Facette Fixierung durchgeführt werden. Fixier-Vorrichtung besteht aus einem U-förmigen Metall-Kanal, um die Maus und zwei verstellbare Edelstahl Arme, die jeder Facette seitlich klemmen unterstützen. Dies bietet eine hervorragende Fixierung der Soll-Wirbel. Nach spinalen Befestigung wird die Wirbelsäule leicht angehoben, um die Halswirbelsäule Krümmung abflacht bessere Belichtung des Rückenmarks bereitzustellen. Sterilisieren Sie die folgenden chirurgischen Instrumenten: 2-3 Pinzetten, 2 Paar Mikroschere, einer 30 G Nadel, Faden und Nadel-Halter, Haut Clips und Clip-Applikator. Desinfizieren Sie die Wirbelsäule Stabilisator. Anesthetize Sie die Maus über eine intraperitoneale Cocktail von Ketamin / Xylazin (100 mg / 10 mg / kg). Rasur der Haare von der Maus den Hals. Nach Reinigung der Haut mit einem PVP-Jod-Lösung und 70% Alkohol, bewegen Sie die Maus auf den OP-Tisch mit einem Heizkissen erwärmt. Titelbild des Tieres Augen mit Augensalbe, um Hornhaut Austrocknen zu verhindern. Nach Einleitung der Narkose (dann erreicht, wenn die Maus nicht zu einem Schwanz Prise reagieren), einen hinteren zervikalen Mittellinie Hautschnitt aus dem Hinterkopf zum subkutanen Fett-Pad der unteren Halswirbelsäule. Unter Vergrößerung, führen Sie einen Einschnitt an der Mittellinie zwischen den Trapezius an C2 und spalten die semispinalis capitis Muskeln. Bezeichnung des submuscular Fettpolster erleichtert Präparation in der richtigen Schicht. Verlängern Sie die Mittellinie Muskel Dissektion kaudal der T2 Dornfortsatz, die als zuverlässige Wahrzeichen dient. Schneiden Sie die Muskeln an der T2 Wirbel und entfernen Sie die knorpeligen Teil der T2Dornfortsatz. Sezieren die paraspinalen Muskeln aus der C2 durch die T2 Plättchen mit einem Paar von Mikro-Schere. Muscle Dissektion beginnt angrenzend an den Dornfortsätzen und sich bilateral die Facettengelenke. Trennen der Muskeln unmittelbar angrenzend an den Dornfortsätzen und Schichten (in der Periostschicht), um die Blutung zu minimieren. Nachdem die seitlichen Facetten ausgesetzt sind, platzieren Sie den Mauszeiger auf dem U-förmigen Kanal des LISA Bühne. Bringen Sie die Edelstahl Armen unter den exponierten Flächen bilateral. Sobald die Arme an ihrem Platz sind, ziehen Sie die Flügelschrauben der Stahl Arme, um die Wirbelsäule zu fixieren. Dies hält feste Fixierung des Ziels Wirbel und bietet gute Belichtung. Die Arme können eingestellt werden, um genaue horizontale Ausrichtung der Wirbelsäule bereitzustellen. Inzision des Lig. flavum zwischen C5 und C6 zu entlarven zugrunde liegenden Dura. Zwischen dem interlaminarer Raum, verwenden Sie eine 30 G Nadel eine kleine Durotomie durch die Mikroschere platziert werden erstellenverlängern die Durotomie. Das Rückenmark ist jetzt bereit, um die kontrollierte Platzwunde Läsion zu unterziehen. 2. Cervical Spinal Cord Laceration Mit dem LISA Gerät Die Breite des zervikalen Rückenmarks Erweiterung variiert auf verschiedenen Ebenen. Machen Sie eine Rückenflosse Hemisektion Läsion an C5-6 mit einem 2,3 mm flachen Klinge und die Amplitude der Schwingung auf die gesamte Breite des Rückenmarks zu decken. Die Klingen sind aus Fine Science Tools Inc. (Foster City, CA) erhalten und modifiziert für Rückenmark Platzwunde. Pflegen der Amplitude der Schwingung der Klinge bei ≥ 0,5 mm, wie geringere Amplitude Ebenen wird die Leichtigkeit der Schnur Zerstörung verringern. Positionieren Sie die Wirbelsäule Stabilisator und Maus auf dem LISA Bühne. Die Klinge ist mit dem LISA mit seiner Position durch Mikro-Treiber in der Lage drei Bereiche der Bewegung gesteuert angebracht. Komponenten der LISA und deren Funktionen sind in Abbildung 1 beschrieben. Macht die Klinge schwingenden einschalten. Unter magnification, bewegen Sie die Maus so, dass der freiliegende Rückenmark befindet sich direkt unter der vibrierenden Klinge positioniert. Elevate die Bühne Unterstützung der Maus in Richtung der schwingenden Klinge. Die "0"-Position wird aufgezeichnet, wenn die Klinge berührt kaum den Dorsalvene des Rückenmarks. Messen Sie die Tiefe des Rückenmarks Platzwunde relativ zur Position "0". Elevate die Bühne Position durch Mikro-Fahrer die Kontrolle: eine 360 ​​° Drehung des Mikro-Treiber Regler hebt die Bühne von 0,25 mm. Somit wird eine 0,75 mm dorsal Hemisektion Läsion durch Drehen der Mikro-Treiber Knopf 3 mal erstellt. Die Genauigkeit der Läsion beträgt ± 0,01 mm. Wie das Blatt beginnt sich das Rückenmark zerfleischen, schmieren die OP-Feld mit Kochsalzlösung Bewässerung. Die Schnitttiefe des Rückenmarks durch die vertikale Mikro-Treiber gesteuert und unabhängig von optischen Führung. Sobald die vorgegebene Tiefe erreicht ist, schalten Sie den Vibrationsalarm ausschalten. Idealerweise wird die oszillierende Klinge in der l positioniertesion Lücke ohne Nachweis von Gewebe Verformung. Senken Sie die Etappe von der Schneide und entfernen Sie das Blut und Kochsalzlösung aus dem OP-Feld mit Baumwolle Q-Tipps. Hämostase tritt spontan in <1 min. Lassen Sie die Maustaste von der Wirbelsäule Stabilisator. Ungefähre die paraspinalen Muskeln mit 6-0 Seidenfaden und schließen die Haut gewickelt mit Edelstahl-Michel Clips. 3. Animal Care Subkutan injizieren insgesamt 1-2 ml Kochsalzlösung auf eine ausreichende Flüssigkeitszufuhr zu halten und die Maus in die Erholung Käfig auf einem Heizkissen während das Bewusstsein wiedererlangt. Geben Sie Wasser und weiche Nahrung ad lib und verwalten Analgetika für 48 Stunden postoperativ. Es besteht keine Notwendigkeit für Blase Versorgung nach dorsal Hemisektion des Rückenmarks.