我们建立了一个门户黑社会闭塞的吊重系统的一种新的小鼠模型。这项技术可能有助于为今后的调查,在小鼠肝模型缺血。
因缺血的急性肝损伤过程中可能出现一些如肝移植,肝肿瘤切除或创伤修复的临床程序,并可能导致肝功能衰竭,具有较高的死亡率1-2。因此小鼠肝缺血的研究已成为一个重要的研究领域提供了机会,利用药理学和遗传学研究3-9。具体来说,有条件组织特定基因缺失小鼠(CRE,FLOX系统)提供了的蛋白质在特定组织的作用10-13见解。由于手动夹紧小鼠入肝,与相 关的技术难度,我们进行了系统评价,使用悬重系统已先前所描述的3入肝闭塞。使用吊重系统,我们将不会造成任何损害肝瓣缝合周围的左支入肝,因为还最好的夹子可用可引起肝组织的损伤,由于肝组织的船只密切位置。此外,右支,肝黑社会仍然从而灌注血流量,肝右叶保留,没有肠道淤血发生这种技术。此外,入肝只操纵在整个手术过程一次。因此,程序,如空调前,缺血再灌注短的时间,可以很容易地进行。这个模型通过执行不同的缺血再灌注时间的系统评价发现与肝损伤的肝缺血时间密切相关,由丙氨酸(ALT)和天门冬氨酸(AST),血清转氨酶水平3,9。两者合计,这些研究证实,高重现肝损伤,肝缺血和间歇性灌注悬重系统时使用。因此,这种技术可能是有用的其他研究者的兴趣在小鼠肝脏缺血研究。因此,视频剪辑,这种技术提供了一个详细的一步一步的描述。
本研究中描述的执行缺血小鼠模型中,由闭塞的左肝入肝使用吊重系统的技术。虽然这是一个简单的方法来学习,应考虑以下的陷阱。在开始时很常见的错误是一种深深的缝,其中包括入肝和腔静脉。在15分钟内,由于阻力增加和减少血液返回到心脏造成小鼠的早期死亡的呼吸和心脏的速度将放慢。最好的办法,以防止包括腔静脉定位针前腔静脉右叶用钳子。另一个重要问题是,权重不重,这可能会导致太多压力也停止血流到右叶的左边和右边的门户试验。因此,在离心瓶的水的量应调整鼠标的重量和Suture持有人应放在远端缝合位置。相反,如果权重低的血压没有完全停止。这两种错误是不易察觉的一个额外的中位数和左叶,右叶或颜色变化不足苍白的颜色变化,分别。因此,肝的颜色变化,运用权重后,应控制在每次10分钟。另一种常见的手术并发症是肝针受伤。因此,应按住右叶一个平淡的镊子,针尖,这样可以很容易看到,并与持针器。如果这些缺陷在开始考虑为肝缺血悬重系统提供了一个高度可重复性,减少变异肝损伤夹紧入肝缺血损伤。使用吊重系统,入肝仅操作一次,在整个手术过程中,造成肝瓣显着减少伤害。此外,无肝,肠充血,发生这种技术。发生更多的组织创伤血管钳,拆卸和更换,尤其是在多个缺血周期,如在缺血预处理钳补办。使用挂在肝组织的远程位置的权重,根据我们的观察,提供了可靠的闭塞的优势,同时防止因操纵钳补办肝叶组织创伤。两者合计,目前的研究提供了入肝闭塞缺血悬重系统的可行性,尽量减少与夹紧的变异和相关的限制。因此,这种技术可能会感兴趣的其他研究者考虑研究肝缺血。
The authors have nothing to disclose.
目前的研究是由美国国家研究院以R01-HL092188卫生补助金,以R01-DK083385和R01HL098294,麻醉教育与研究基金会的支持(发耳)授予李鹏和1东风集团(德意志研究联合会)研究奖学金(GR2121/1- 1)和美国心脏协会的资助到AG。
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Sodium Pentobarbital (Fatal Plus) | Vortech Pharmaceutical Ls, Ltd | V.P.L. 9372 | 4 mg/mL in saline |
Suture, Prolene 8.0 | Ethicon, USA | M8739 | reusable |
dissecting microscope | Leica | n/a | consider generous working distance |
Heating Table | Rt, Effenberger, Germany | n/a | only and single provider |
Surgical instruments | WPI, Dumont | Forceps, needle holder | |
Coagulator | Erbe, ICC50, Tuebingen, Germany | n/a | Different providers of coagulators |
Table 1. Specific reagents and equipment.