La medición del complemento hemolítico 50% (CH ₅₀) La actividad de suero

El sistema del complemento es un grupo de proteínas que cuando se activa conducir a la lisis celular de destino y facilita la fagocitosis por opsonización. Los componentes individuales del complemento pueden ser cuantificados sin embargo, esto no proporciona ninguna información en cuanto a la actividad de la vía. El CH₅₀ Es un ensayo de cribado para la activación de la vía clásica del complemento (Fig. 1) y es sensible a la reducción, la ausencia y / o inactividad de cualquiera de los componentes de la vía. El CH₅₀ Pruebas de la capacidad funcional de los componentes del complemento del suero de la vía clásica de lisar glóbulos rojos de oveja (SRBC) pre-recubiertos con conejo anti-oveja de anticuerpos de glóbulos rojos (hemolisina). Cuando recubiertas de anticuerpos SRBC se incuban con suero, la vía clásica del complemento se activa y los resultados de hemólisis. Si un componente del complemento está ausente, el CH₅₀ El nivel va a ser cero, si uno o más componentes de la vía clásica se reducen, el CH₅₀ Se reducirá. Un volumen fijo de SRBC sensibilizados de forma óptima se añade a cada dilución de suero. Después de la incubación, se centrifuga la mezcla y el grado de hemólisis se cuantifica mediante la medición de la absorción de la hemoglobina liberada en el sobrenadante a 540 nm. La cantidad de la actividad del complemento se determina al examinar la capacidad de las diferentes diluciones del suero para lisar SRBC recubiertas de anticuerpos. Este video muestra los pasos experimentales que participan en el análisis del nivel de actividad del complemento de la vía clásica del complemento.