정형소 주입 : 성인 마우스에 조직 특정 암세포를 이식

시작하려면 마취 된 마우스를 수술 침대에 놓고 통증을 완화하기위한 진통제 인 buprenorphine을 어깨에 피하하십시오. 다음으로, 마우스 코를 코 마스크에 삽입하여 동물에게 이소플루란과 같은 산소 및 마취제를 지속적으로 공급합니다. 일부 실험실 테이프를 사용하여 팔다리를 고정하고 클로르헨시딘과 요오드, 2개의 소독제 및 에탄올로 흉부 피부를 살균합니다.

이제 가위를 사용하여 전방 가슴 벽 의 중간에 절개를하고 포셉으로 피부를 반전하여 흰색 유방 지방 패드를 노출시하십시오. 생체 발광 단백질을 발현하는 암 세포 현탁액을 유방 지방 패드에 조심스럽게 주입하십시오. 역류를 방지하기 위해 바늘을 당기기 전에 5 초 동안 기다립니다. 지방 패드를 부드럽게 풀어 내고 멸균 봉합사를 사용하여 절개를 스티치하고 닫습니다.

매머 지방 패드 내부의 주입 된 암세포는 종양을 형성하기 위해 빠르게 나눕니다. 수술 후 동물을 케이지로 되돌리게 합니다. 동물마취에서 회복되고 자유롭게 움직이기 시작할 때까지 동물을 면밀히 모니터링합니다.

다음 프로토콜에서, 우리는 성인 마우스의 유방 지방 패드에 루시파제를 표현하는 유방 선암 세포를 이식할 것입니다.

먼저 마취된 여성 마우스에 발가락 꼬집어에 대한 반응이 부족한지 확인하고 동물의 팔다리를 수술 보드에 테이핑하는 것으로 시작합니다. 멸균 면봉을 사용하여 클로르헨시딘, 요오드 및 75 % 에탄올로 수술 부위를 살균하고 전방 가슴 벽 한가운데에 5 밀리미터 피부 절개를합니다. 다음으로 절개에 인접한 피부의 오른쪽을 들어 올리고 멸균 미세 절 가위를 사용하여 가슴 벽에서 피부를 분리합니다.

피부를 반전하여 올바른 2번 유방 지방 패드를 노출시키고 28.5 게이지 바늘이 장착된 1밀리리터 인슐린 주사기를 사용하여 상처를 통해 암세포 현탁액 20마이크로리터를 조심스럽게 지방 패드에 주입합니다. 젤라틴 암 세포 단백질 혼합물이 바늘을 제거하기 전에 고화할 수 있도록 지방 패드 내에서 5 초 동안 바늘을 잡고 멸균 5-0 비 흡수 성 봉합사로 절개를 닫습니다. 그런 다음 동물을 깨끗한 케이지에 넣고 전체 재조정까지 모니터링하십시오.