正体注射:組織特異的がん細胞を成人マウスに移植する

まず、麻酔をかけたマウスを手術用ベッドに置き、痛みを和らげるために鎮痛剤であるブプレノルフィンを肩に皮下に注入する。次に、マウスの鼻を鼻マスクに挿入して、イオフルランなどの酸素および麻酔薬を動物に連続的に供給する。いくつかのラボテープを使用して、手足を固定化し、クロルヘキシジンとヨウ素、2つの消毒剤、およびエタノールで胸部皮膚を殺菌します。

今、前胸壁の真ん中に切開を行い、白い乳腺脂肪パッドを露出させるために鉗子で皮膚を反転させるためにはさみを使用してください。乳腺脂肪パッドに生物発光タンパク質を発現する癌細胞懸濁液を慎重に注入する。5秒間待ってから針を引き出して、逆流を防ぎます。脂肪パッドを静かに解放し、滅菌縫合糸を使用して切開を縫い合わせ、閉じます。

乳腺脂肪パッド内に注入された癌細胞は急速に分裂して腫瘍を形成する。手順の後にケージに動物を返します。麻酔から回復し、自由に動き始めるまで、動物を注意深く監視します。

次のプロトコルでは、ルシファーゼを発現する乳腺癌細胞を成人マウスの乳腺脂肪パッドに移植する。

まず、麻酔を受けた雌マウスのつまみつまみへの応答の欠如を確認し、動物の手足を外科用ボードにテーピングすることから始めます。滅菌綿棒を用いて、クロルヘキシジン、ヨウ素、および75%エタノールで手術領域を殺菌し、胸壁の真ん中に5ミリメートルの皮膚切開を行う。次に、切開に隣接する皮膚の右側を持ち上げ、滅菌マイクロ解剖ハサミを使用して胸壁から皮膚を取り外します。

皮膚を反転させて、右の2番目の乳腺脂肪パッドを露出させ、28.5ゲージ針を備えた1ミリリットルのインスリン注射器を使用して、脂肪パッドに創傷を通して20マイクロリットルの癌細胞懸濁液を慎重に注入する。脂肪パッド内で針を5秒間保持し、ゼラチン性癌細胞タンパク質混合物が針を取り除く前に固化し、滅菌5-0非吸収性縫合糸で切開を閉じる。その後、完全な債務まで監視ときれいなケージに動物を置きます。