Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
للبدء ، ضع فأرا مخدرا على سرير جراحي وحقن البوبرينورفين ، وهو مسكن لتخفيف الألم ، تحت الجلد في الكتف. بعد ذلك ، أدخل أنف الماوس في قناع الأنف لتوفير إمدادات مستمرة من الأكسجين والتخدير ، مثل isoflurane للحيوان. باستخدام بعض الشريط المختبر، شل الأطراف وتعقيم الجلد الصدر مع الكلورهيكسيدين واليود، واثنين من المطهرات، والإيثانول.
الآن استخدام مقص لجعل شق في منتصف جدار الصدر الأمامي وعكس الجلد مع ملقط لفضح وسادة الدهون الثديية البيضاء. حقن بعناية تعليق الخلايا السرطانية التعبير عن بروتين الإنارة الحيوية في وسادة الدهون الثديي. انتظر لمدة 5 ثوان قبل سحب الإبرة لمنع التدفق الخلفي. حرر وسادة الدهون برفق واستخدم الغرز العقيمة لغرزة الجرح وإغلاقه.
تنقسم الخلايا السرطانية المحقونة داخل وسادة الدهون الثديية بسرعة لتشكيل ورم. إعادة الحيوان إلى قفص بعد العملية. مراقبة عن كثب الحيوان حتى يتعافى من التخدير ويبدأ التحرك بحرية.
في البروتوكول التالي، سنقوم بزرع خلايا الورم الغدي الثديي التي تعبر عن لوسيفيراز في وسادة الدهون الثديية للفأر البالغ.
ابدأ بتأكيد عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في فأرة أنثى مخدرة وتسجيل أطراف الحيوان في لوحة جراحية. باستخدام مسحات القطن المعقمة، قم بتعقيم المنطقة الجراحية بالكلورهيكسيدين واليود والإيثانول بنسبة 75٪، واصنع شقا جلديا من عيار خمسة ملليمترات في منتصف جدار الصدر الأمامي. بعد ذلك، ارفع الجانب الأيمن من الجلد المجاور للشق واستخدم مقص التشتيت الدقيق العقيم لفصل الجلد عن جدار الصدر.
عكس الجلد لفضح الحق رقم اثنين من وسادة الدهون الثديية واستخدام حقنة الأنسولين ملليلتر واحد مجهزة إبرة قياس 28.5 لحقن بعناية 20 ميكرولتر من تعليق الخلايا السرطانية من خلال الجرح في لوحة الدهون. عقد الإبرة داخل لوحة الدهون لمدة خمس ثوان للسماح للخليط بروتين الخلية السرطانية الجيلاتينية لترسيخ قبل إزالة الإبرة، وإغلاق الشق مع الغرز العقيمة 5-0 غير قابلة للامتصاص. ثم ضع الحيوان في قفص نظيف مع المراقبة حتى إعادة شغله بالكامل.
