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Ensaios de Retardamento de Gel de Agarose Protein-tRNA para Análise do<em> N</em<sup> 6</sup> -Treonilcarbamoyladenosina TcdA Function
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JoVE Journal Biochemistry
Protein-tRNA Agarose Gel Retardation Assays for the Analysis of the N6-threonylcarbamoyladenosine TcdA Function

Ensaios de Retardamento de Gel de Agarose Protein-tRNA para Análise do<em> N</em<sup> 6</sup> -Treonilcarbamoyladenosina TcdA Function

DOI:
10.3791/55638-v

•

08:03 min

•

June 21, 2017

•

, , , ,
1Department of Physical Chemical Biology, Center for Biological Research (CIB-CSIC),Spanish National Research Council (CSIC), 2Department of Immunology,Complutense University School of Medicine, 3Abvance Biotech srl

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:13Preparation of the tRNA
  • 02:44Lysis, Extraction, and Purification of tRNA(UUU)
  • 04:05Sample Preparation
  • 05:09Gel Electrophoresis and Staining to Observe tRNA-Protein Interaction
  • 06:33Results: Evaluation of the Interaction Between TcdA and tRNA(UUU)
  • 07:22Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Um protocolo é apresentado para a produção de tRNA (UUU) e a análise de tRNA (UUU) em complexo com a enzima TcdA por ensaios de retardamento de gel de agarose.

Tags

Keywords: Protein-tRNA InteractionAgarose Gel Retardation AssayRNA-binding ProteinsTcdA FunctionRNA BiologyProtein-RNA ComplexesE. Coli BL21 DE3PET-23D EC Triple-UIPTG InductionCell LysisAcid Phenol Extraction

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