Visualización de condrocitos Intercalación y direccional proliferación a través de análisis celular clonal Zebrabow en el cartílago de la embrionaria Meckel

Desarrollo craneofacial requiere, interacciones celulares y tisulares moleculares complejas para impulsar la proliferación celular, la migración y la diferenciación ^{1,2, 3.} Este proceso estrechamente regulado y complejo está sujeto a perturbaciones genéticas y ambientales, de tal manera que las deformidades craneofaciales se encuentran entre las malformaciones congénitas más comunes ^1-9. Si bien las intervenciones quirúrgicas siguen siendo la base del tratamiento de anomalías craneofaciales, la comprensión de la base del desarrollo es esencial para innovar terapias futuras. Por lo tanto, el estudio de la morfogénesis y los mecanismos en la convergencia y la extensión y la integración de células proporciona nuevos conocimientos sobre la formación del esqueleto craneofacial ^1.

Craneal migrar y la cresta neural pueblan el primer arco faríngeo, procesos mandibulares luego formar pares que se extienden para formar el cartílago de Meckel, que prefigura la mandíbula. Morfogénesis of cartílago de Meckel requiere organización condrocitos mediante la proliferación de dirección, la polarización celular ^y 1,10 diferenciación. Sin embargo, la complejidad de la organización de los condrocitos en el crecimiento y la extensión del cartílago de Meckel sigue siendo poco clara. Comprender el comportamiento celular dinámica es fundamental para comprender las malformaciones congénitas que afectan al tamaño de la mandíbula, como fenotipos mandíbula hipoplasia ^11.

Embriones de pez cebra ofrecen muchas ventajas del desarrollo y genéticos para el estudio detallado de los cartílagos morfogénesis de Meckel. Su maleabilidad genética, la transparencia, la ex vivo y el rápido desarrollo son poderosas ventajas de préstamos bien para la observación del movimiento celular y la organización de imágenes en vivo ^6. El uso de herramientas de trazado de linaje, como SOX10: línea transgénica Kaede, nosotros y otros han delineado los orígenes de la cresta neural del esqueleto craneofacial embrionaria ^1,5. Using del SOX10: ERT2-Cre con el ubi: línea transgénica Zebrabow-M, ahora es posible explorar los detalles de los movimientos celulares durante el desarrollo craneofacial. El Zebrabow-M, es una línea transgénica diseñado con el promotor de ubiquitina de conducir la expresión de diferentes fluoróforos, cada uno flanqueado por sitios lox ^8. El fluoróforo predeterminado Zebrabow-M es rojo, expresando RFP. Después de la inducción de la expresión de Cre, la Zebrabow-M construir recombina y células expresan una combinación de diferentes fluoróforos (RFP, CFP y YFP) la creación de expresión multi-espectral en el embrión. Todas las células hijas que dividen a partir de las células marcadas después del evento de recombinación son entonces clonalmente etiquetados, de modo que las poblaciones de células que se derivan de diferentes progenitores yuxtapuestas están etiquetados clonalmente. Por este etiquetado celular clonación, la proliferación de células y la migración con la resolución clonal pueden ser seguidos (Figura 1 y 2).