Visualisation des chondrocytes intercalation et directionnel prolifération clonale via Zebrabow analyse cellulaire dans le cartilage de l'embryonnaire Meckel

Développement craniofaciale exige, les interactions cellulaires et tissulaires moléculaires complexes à conduire la prolifération cellulaire, migration et la différenciation ^{1,2, 3.} Ce processus étroitement régulé et complexe est soumis à des perturbations génétiques et environnementaux, tels que des malformations cranio-faciales sont parmi les malformations congénitales les plus courantes ^1-9. Bien que les interventions chirurgicales restent le pilier du traitement des anomalies crânio-faciales, la compréhension de la base de développement est essentiel d'innover futures thérapies. Par conséquent, l'étude de la morphogenèse et les mécanismes de la convergence et l'extension et l'intégration de cellules fournit de nouvelles indications sur la formation du squelette cranio-facial ^1.

Crânienne migration de la crête neurale et remplir le premier arc pharyngien, processus mandibulaires forment alors jumelés qui se prolongent pour former le cartilage de Meckel, qui préfigure la mandibule. Morphogenèse of cartilage de Meckel l'organisation nécessite prolifération des chondrocytes par directionnel, la polarisation et la différenciation cellulaires ^1,10. Cependant, la complexité de l'organisation des chondrocytes dans la croissance et l'extension du cartilage de Meckel reste incertaine. Comprendre le comportement dynamique de la cellule est essentielle pour comprendre les malformations congénitales affectant la taille mandibulaire, comme phénotypes mandibule hypoplasie ^11.

Embryons de poisson zèbre offrent de nombreux avantages développementaux et génétiques pour étude détaillée du cartilage de la morphogenèse de Meckel. Leur traçabilité génétique, la transparence, ex vivo et le développement rapide des avantages puissants de prêt bien pour l'observation du mouvement et de l'organisation cellulaire par l'imagerie en direct ^6. Utilisation des outils de la lignée de traçage, comme SOX10: lignée transgénique kaede, nous et d'autres avons délimité les origines de la crête neurale du squelette cranio-facial embryonnaire ^1,5. Using l'SOX10: ERT2-Cre avec le ubi: Zebrabow-M lignée transgénique, il est maintenant possible d'explorer les détails des mouvements cellulaires au cours du développement cranio-facial. Le Zebrabow-M, est une lignée transgénique conçu avec le promoteur de l'ubiquitine de conduire l'expression de différents fluorophores, chacun flanqué par des sites Lox ^8. Le fluorophore par défaut Zebrabow-M est rouge, exprimant RFP. Après induction de l'expression Cre, l'Zebrabow-M construire recombine et cellules expriment une combinaison de différents fluorophores (DP, CFP et YFP) créant expression multi-spectrale dans l'embryon. Toutes les cellules filles qui divisent des cellules marquées après l'événement de recombinaison par clonage sont ensuite marquées, de sorte que des populations de cellules qui dérivent de progéniteurs différentes sont juxtaposées par clonage étiquetés. En ce marquage cellulaire de clonage, les cellules prolifération et la migration à la résolution peuvent être suivies clonale (figure 1 et 2).