胚性メッケル軟骨でZebrabowクローン細胞分析によって軟骨細胞のインターカレーションと方向性増殖の可視化

頭蓋顔面の開発は、細胞増殖、遊走および分化^{1,2、3を駆動するための}複雑な分子、細胞および組織の相互作用を必要とします。この厳密に調節し、複雑なプロセスは、頭蓋顔面奇形は、最も一般的な先天性奇形^1-9中にあるように、遺伝的および環境的摂動の対象となります。外科的介入は、開発の基礎を理解し、頭蓋顔面異常を治療の中心残っているが、将来の治療法を革新することが不可欠です。したがって、収束と拡張および細胞統合における形態形成および機構を研究することは、頭蓋顔面の骨格¹の形成に新たな洞察を提供しています。

頭蓋神経堤は、下顎をprefiguresメッケル軟骨を形成するために、拡張ペアの下顎のプロセスを形成した後、最初の咽頭弓を移行し、移入します。形態形成Oメッケル軟骨F方向性増殖、細胞分極と分化^1,10を経由して軟骨細胞組織を必要とします。しかし、メッケル軟骨の成長と拡張に軟骨細胞組織の複雑さは不明なままです。動的な細胞の挙動を理解することは、このような形成不全下顎の表現型^11と下顎の大きさに影響する先天性奇形を、理解するために重要です。

ゼブラフィッシュの胚はメッケル軟骨の形態形成の詳細な研究のための多くの発達と遺伝的利点を提供します。彼らの遺伝的扱いやすさ、透明性、ex vivoでかつ急速な発展は、ライブイメージング^6による細胞運動と組織の観察のためによく、それを貸し強力な利点です。そのようなSOX10などの系譜トレースツール、 使用 ：楓トランスジェニック系統を、私たちと他の人は、胚の頭蓋顔面の骨格^1,5の神経堤起源を描写しています。 USIUBIでERT2-Creを：SOX10 ngを Zebrabow-Mトランスジェニック系統は、頭蓋顔面の開発中の細胞の動きを詳細に探索することが可能になりました。 Zebrabow-Mは、異なる蛍光体の発現を駆動するユビキチンプロモーター、lox部位⁸が隣接し、それぞれに操作されたトランスジェニックラインです。 Zebrabow-Mのデフォルトのフルオロフォアは、RFPを発現し、レッドです。 Cre発現の誘導後、Zebrabow-Mは、再結合を構築し、細胞が胚におけるマルチスペクトル式を作成する異なる蛍光体（RFP、CFPとYFP）の組み合わせを発現します。別の並置された前駆細胞に由来する細胞集団がクローンラベル付けされるように、再結合イベントの後に標識された細胞から分裂し、すべての娘細胞は、その後、クローン、標識されています。このクローン細胞標識によって、クローンの解像度を有する細胞の増殖及び遊走（図1 及び2）に従うことができます。