İki Foton Lazer Aksotomi: Zebra Balığı Embriyolarındaki Aksonları Yaralama ve Aksonal İyileşmeyi Gözlemleme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: O’Brien G. S., vd. Canlı zebra balığı embriyolarında iki fotonlu axotomy ve zaman atlamalı konfokal görüntüleme. J. Vis. Exp. (2009).
Bu videoda zebra balığı embriyolarındaki aksonlara iki foton lazer aksektomi kullanılarak ve yaralanmadan aksonal iyileşme gözlemlenerek yaralanma yöntemi açıklanmaktadır.
Protocol
1: Bukalemun Ti-Safir lazer ile özel yapım iki foton mikroskop kullanılarak iki fotonlu aksotomi Görüntüleme için hazırlanın. Monte edilen embriyoları mikroskop altındaki bir slayt tutucusuna yerleştirin. 40X (0.8 NA) su hedefi olan bir embriyoya odaklanın. Lazeri açın. Aşağıdaki parametreleri kullanarak nöronları ifade eden GFP’yi tekrar tekrar görselleştirebildik ve zarar verdik. Aksonları zarar vermeyen bir güçte görselleştirmek için lazeri 910 nanometre (nm) dalga boyu ve 30 mili…
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).