Twee-Foton Laser Axotomie: Een methode om axonen in zebravisembryo's te verwonden en axonale herstel te observeren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: O’Brien G. S., et al. Twee-foton axotomie en time-lapse confocale beeldvorming in levende zebravis embryo’s. J. Vis. Exp. (2009).
Deze video beschrijft de methode om axonen in zebravisembryo’s te verwonden met behulp van twee fotonlaseraxotomie en het observeren van axonale herstel van letsel.
Protocol
1: Twee-foton axotomie met behulp van een op maat gemaakte twee-foton microscoop met een Chameleon Ti-Sapphire laser Bereid je voor op beeldvorming. Plaats de gemonteerde embryo(‘s) op een schuifhouder onder de microscoop. Focus op één embryo met een 40X (0.8 NA) waterdoelstelling. Zet de laser aan. We zijn in staat geweest om GFP-uitdrukkende neuronen reproduceerbaar te visualiseren en te beschadigen met behulp van de volgende parameters. Om axonen op een niet-schadelijk vermogen te visualiseren, stelt u de …
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).