Axotomia laser de dois fótons: um método para ferir axônios em embriões de zebrafish e observar a recuperação axonal
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: O’Brien G. S., et al. Axotomia de dois fótons e imagens confocal de lapso de tempo em embriões de zebrafish vivos. J. Vis. Exp. (2009).
Este vídeo descreve o método para ferir axônios em embriões de zebrafish usando duas axotomia a laser de fótons e observando a recuperação axonal de lesões.
Protocol
1: Axotomia de dois fótons usando um microscópio de dois fótons construído sob medida com um laser Camaleão Ti-Safira Preparem-se para a imagem. Coloque o embrião montado em um porta-slides sob o microscópio. Concentre-se em um embrião com um objetivo de água 40X (0,8 NA). Ligue o laser. Conseguimos visualizar e danificar os neurônios expressando GFP reproduzindo os seguintes parâmetros. Para visualizar axônios a uma potência não prejudicial, defina laser para um comprimento de onda de 910 nanôme…
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).