Axotomía láser de dos fotones: un método para herir axones en embriones de pez cebra y observar la recuperación axonal
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: O’Brien G. S., et al. Axotomía de dos fotones e imágenes confocales de lapso de tiempo en embriones de pez cebra vivos. J. Vis. Exp. (2009).
Este video describe el método para herir axones en embriones de pez cebra utilizando dos axotomía láser fotónelina y observando la recuperación axonal de lesiones.
Protocol
1: Axotomía de dos fotones usando un microscopio de dos fotones construido a medida con un láser Chameleon Ti-Sapphire Prepárense para la toma de imágenes. Coloque los embriones montados en un portaobjetos debajo del microscopio. Concéntrate en un embrión con un objetivo de agua 40X (0.8 NA). Enciende el láser. Hemos sido capaces de visualizar y dañar reproduciblemente GFP expresando neuronas utilizando los siguientes parámetros. Para visualizar axones a una potencia no dañina, ajuste el láser a una …
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).