Axotomia laser a due fotoni: un metodo per ferire gli assoni negli embrioni di zebrafish e osservare il recupero assonale
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: O’Brien G. S., et al. Axotomia a due fotoni e imaging confocale time-lapse in embrioni di zebrafish vivi. J. Vis. Exp. (2009).
Questo video descrive il metodo per ferire gli assoni negli embrioni di zebrafish usando due assotomi laser fotoni e osservando il recupero assonale dalle lesioni.
Protocol
1: Assotomia a due fotoni con un microscopio a due fotoni costruito su misura con un laser Chameleon Ti-Sapphire Preparatevi per l’imaging. Posizionare gli embrioni montati su un supporto scorrevole al microscopio. Concentrati su un embrione con un obiettivo idrico 40X (0,8 NA). Accendi il laser. Siamo stati in grado di visualizzare e danneggiare in modo riproducibile gfp esprimendo neuroni utilizzando i seguenti parametri. Per visualizzare gli assoni ad una potenza non dannosa, impostare il laser su una lunghe…
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).