סרטון זה מתאר את השיטה לפצוע אקסונים בעוברים של דגי זברה באמצעות שני אקסוטומיה של לייזר פוטון והתבוננות בהתאוששות אקסונלית מפציעה.
Protocol
1: אקסוטומיה דו פוטונית באמצעות מיקרוסקופ שני פוטון בנוי בהתאמה אישית עם לייזר זיקית Ti-ספיר היכונו להדמיה. הנח את העוברים המותקנים על מחזיק שקופית מתחת למיקרוסקופ. התמקד בעובר אחד עם מטרה מים 40X (0.8 NA). תדליק את הלייזר. הצלחנו לשחזר ולפגוע ב- GFP המבטאים נוירונים באמצעות הפרמטרים הבאים. כד…
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).