Zwei-Photonen-Laser-Axotomie: Eine Methode, um Axone in Zebrafisch-Embryonen zu verletzen und axonale Erholung zu beobachten
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: O’Brien G. S., et al. Zweiphotonen-Axotomie und Zeitraffer-Konfokalbildgebung in lebenden Zebrafischembryonen. J. Vis. Exp. (2009).
Dieses Video beschreibt die Methode, Axone in Zebrafischembryonen mit zwei Photonenlaser-Axotomie zu verletzen und axonale Erholung von Verletzungen zu beobachten.
Protocol
1: Zwei-Photonen-Axotomie mit einem maßgeschneiderten Zwei-Photonen-Mikroskop mit einem Chameleon Ti-Sapphire Laser Bereiten Sie sich auf die Bildgebung vor. Stellen Sie die montierten Embryonen auf einen Diahalter unter das Mikroskop. Konzentrieren Sie sich auf einen Embryo mit einem 40X (0.8 NA) Wasserobjektiv. Schalten Sie den Laser ein. Wir konnten GFP-exemittierte Neuronen mit den folgenden Parametern reproduzierbar visualisieren und schädigen. Um Axone mit einer nicht schädlichen Leistung zu visualisie…
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).