Axotomie laser à deux photons : une méthode pour blesser les axones dans les embryons de poisson zèbre et observer la récupération axonale
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : O’Brien G. S., et coll. Axotomie à deux photons et imagerie confocale en accéléré chez les embryons vivants de poisson zèbre. J. Vis. Exp. (2009).
Cette vidéo décrit la méthode pour blesser les axones dans les embryons de poisson zèbre en utilisant deux axotomie laser photon et en observant le rétablissement axonal de la blessure.
Protocol
1: Axotomie à deux photons à l’aide d’un microscope à deux photons construit sur mesure avec un laser Caméléon Ti-Sapphire Préparez-vous à l’imagerie. Placer l’embryon monté sur un porte-diapositives sous le microscope. Concentrez-vous sur un embryon dont l’objectif d’eau est de 40 X (0,8 NA). Allumez le laser. Nous avons été en mesure de visualiser et d’endommager de façon reproductible GFP exprimant les neurones en utilisant les paramètres suivants. Pour visualiser les axones à une …
Cite This Article
Two-Photon Laser Axotomy: A Method to Injure Axons in Zebrafish Embryos and Observe Axonal Recovery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20188, doi: (2023).