Ensaio da Ilha: Um Método de Alto Rendimento para Avaliar o Comportamento Locomotor de Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Eidhof, I., et al. High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay. J. Vis. Exp. (2017).

Este vídeo descreve o ensaio da ilha, um método comportamental usado para estudar a locomoção de Drosophila. O protocolo de amostra apresenta uma configuração para o ensaio compatível com análise de imagem semi-automatizada.

Protocol

Este protocolo é um trecho de Eidhof et al., High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Construção da Caixa de Ensaio da Ilha Prepare uma bandeja feita de um material robusto, como o poli metil metil methacrilato (PMMA), para conter uma camada de água (ou seja, um banho). Certifique-se de que o material não é branco.NOTA: São recomendadas dimensões…

Representative Results

Figura 1: Fluxograma delineando os requisitos, procedimento experimental e análise do ensaio da ilha. (A) Equipamento de ensaio de ilha. (B) Configuração experimental para o ensaio da ilha. (C)Ensaio da ilha. (D) Processamento de dados de ensaios insulares com a macro “Drosophila Island Assay”. A macro”Drosophila Island Assay” é comp…

Materials

25 x 95 mm Drosophila vials Flystuff 32-116SB
Logitech C525 HD Webcam Logitech Any webcam with USB connection is suitable.
Stand to hold webcam
Lamp 12 V LED lights are appropriate
Pounding pad Any mouse pad works
Island Assay box Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent.
Island Assay bath Dimensions 42x38x25 cm. Non white.
Island/platform Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white.
Soap Standard dishwashing detergent is suitable.
Computer Scripts run both on Windows and Mac
Image-recording software: HandiAvi® AZcendant® HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript.
It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0)
Image-recording software: WebcamCapture Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from:
https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/
When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript,
with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the
corresponding experimental replicate folder.
Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting.

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Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).

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