האי Assay: שיטת תפוקה גבוהה כדי להעריך את התנהגותו של דרוזופילה לוקומוטור
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: Eidhof, I., ואח ‘. ניתוח תפוקה גבוהה של התנהגות לוקומוטור באי דרוזופילה אסאי. ג’יי ויס אקספ. (2017).
סרטון זה מתאר את מבחני האי, שיטה התנהגותית המשמשת לחקר תנועה של דרוזופילה. הפרוטוקול לדוגמה כולל הגדרה עבור התואם לבדיקה עם ניתוח תמונה אוטומטי למחצה.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Eidhof et al., ניתוח תפוקה גבוהה של התנהגות לוקומוטור באי דרוזופילה Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. בניית קופסת אסאי האי הכן מגש עשוי מחומר חזק, כגון פולי מתיל מתקרילט (PMMA), כדי להכיל שכבת מים(כלומר אמבטיה). ודא שהחומר אינו לבן.שים לב:…
Representative Results
איור 1: תרשים זרימה המתאר את הדרישות, ההליך הניסיוני וניתוח מבחני האי. (A)ציוד בדיקה של האי. (B)התקנה ניסיונית עבור מבחני האי. (ג)מבחני האי. (D)עיבוד נתוני מבחני האי עם המאקרו”Drosophila Island Assay”. המאקרו”…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).