Ensayo isleño: un método de alto rendimiento para evaluar el comportamiento locomotor de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Eidhof, I., et al. Análisis de alto rendimiento del comportamiento locomotor en el ensayo de la isla de Drosophila . J. Vis. (2017).
Este video describe el ensayo de la isla, un método conductual utilizado para estudiar la locomoción de Drosophila. El protocolo de ejemplo cuenta con una configuración para el ensayo compatible con el análisis de imágenes semiautomático.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Eidhof et al., High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Construcción de la caja de ensayo de la isla Prepare una bandeja hecha de un material robusto, como el metacrilato de polimetilo (PMMA), para contener una capa de agua(es decir, un baño). Asegúrese de que el material no sea blanco.NOTA: Se recomiendan dimensiones …
Representative Results
Figura 1: Diagrama de flujo que describe los requisitos, el procedimiento experimental y el análisis del ensayo de la isla. (A) Equipo de ensayo de la isla. (B) Configuración experimental para el ensayo de la isla. (C) Ensayo de la isla. (D) Procesamiento de datos de ensayos insulares con la macro “Ensayo de la islade Drosophila”. La macro”…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).