Insel-Assay: Eine High-Throughput-Methode zur Bewertung des Drosophila-Lokomotor-Verhaltens
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Eidhof, I., et al. High-Throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay. J. Vis. (2017).
Dieses Video beschreibt den Inseltest, eine Verhaltensmethode, die verwendet wird, um Drosophila-Fortbewegung zu studieren. Das Beispielprotokoll verfügt über ein Setup für den Test, der mit der halbautomatischen Bildanalyse kompatibel ist.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Eidhof et al.,High-Throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Bau der Island Assay Box Bereiten Sie eine Schale aus einem robusten Material, wie Polymethylmethacrylat (PMMA), vor, um eine Wasserschicht(d. h. ein Bad) zu enthalten. Stellen Sie sicher, dass das Material nicht weiß ist.HINWEIS: Es werden Abmessungen von 40 x 35…
Representative Results
Abbildung 1: Flussdiagramm, das die Anforderungen, das experimentelle Verfahren und die Analyse des Inseltestes umreißt. (A) Insel-Assay-Ausrüstung. (B) Versuchsaufbau für den Inseltest. (C) Insel-Assay. (D) Verarbeitung von Insel-Assay-Daten mit dem Makro”Drosophila Island Assay”. Das”Drosophila Island Assay”-Makro besteht aus 3 Subm…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).