Island Assay: Une méthode à haut débit pour évaluer le comportement locomoteur Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Eidhof, I., et autres analyse de haut débit du comportement locomoteur dans l’essai d’île de Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).
Cette vidéo décrit l’analyse de l’île, une méthode comportementale utilisée pour étudier la locomotion Drosophila. Le protocole de l’échantillon dispose d’une configuration pour l’analyse compatible avec l’analyse d’image semi-automatisée.
Protocol
Ce protocole est un extrait d’Eidhof et coll.,High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Construction de la boîte d’analyse de l’île Préparer un plateau fait d’un matériau robuste, comme le méthacrylate poly méthyle (PMMA), pour contenir une couche d’eau(c.-à-d. un bain). Assurez-vous que le matériau n’est pas blanc.REMARQUE: Des dimens…
Representative Results
Figure 1 : Flowchart décrivant les exigences, la procédure expérimentale et l’analyse de l’analyse de l’île. (A) Équipement d’analyse de l’île. (B) Configuration expérimentale pour l’essai de l’île. (C) Essai de l’île. (D) Traitement des données d’analyse de l’île avec la macro” Drosophila Island Assay « . La macr…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).