Saggio dell'isola: un metodo ad alta produttività per valutare il comportamento locomotore della Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Eidhof, I., et al. J. Vis. Exp. (2017).
Questo video descrive il saggio dell’isola, un metodo comportamentale utilizzato per studiare la locomozione di Drosophila. Il protocollo di esempio presenta una configurazione per il test compatibile con l’analisi semi-automatizzata delle immagini.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Eidhof et al.,High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. 1. Costruzione della scatola di saggi dell’isola Preparare un vassoio fatto di un materiale robusto, come il metacrilato di polimetile (PMMA), per contenere uno stratod’acqua (cioè un bagno). Assicurarsi che il materiale non sia bianco.NOTA: Si raccomandano dimensioni di 40 …
Representative Results
Figura 1: Diagramma di flusso che delinea i requisiti, la procedura sperimentale e l’analisi del saggio dell’isola. (A) Apparecchiature per il dosaggio dell’isola. (B) Installazione sperimentale per il saggio dell’isola. (C) Saggio dell’isola. (D) Elaborazione dei dati di dosaggio dell’isola con la macro”Drosophila Island Assay”. La macro “Dr…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).