Ensaio da Ilha: Um Método de Alto Rendimento para Avaliar o Comportamento Locomotor de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Eidhof, I., et al. High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay. J. Vis. Exp. (2017).
Este vídeo descreve o ensaio da ilha, um método comportamental usado para estudar a locomoção de Drosophila. O protocolo de amostra apresenta uma configuração para o ensaio compatível com análise de imagem semi-automatizada.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Eidhof et al., High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Construção da Caixa de Ensaio da Ilha Prepare uma bandeja feita de um material robusto, como o poli metil metil methacrilato (PMMA), para conter uma camada de água (ou seja, um banho). Certifique-se de que o material não é branco.NOTA: São recomendadas dimensões…
Representative Results
Figura 1: Fluxograma delineando os requisitos, procedimento experimental e análise do ensaio da ilha. (A) Equipamento de ensaio de ilha. (B) Configuração experimental para o ensaio da ilha. (C)Ensaio da ilha. (D) Processamento de dados de ensaios insulares com a macro “Drosophila Island Assay”. A macro”Drosophila Island Assay” é comp…
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Citar este artigo
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).