Мышь Модели перивентрикулярной лейкомаляции

Подробные процедуры создания новорожденных мозговой травмы в P6 мышей: Послеродовая день 6 (Р6) мышей под наркозом с косвенным охлаждением на льду на грани отсутствие реакции на стимуляцию вредных (глубокий наркоз). После очистки кожи спиртом, средней линии вентральной разрез делается в передней шеи. Под микроскопом рассекает, бифуркации правой общей сонной артерии приближается мягко втягивания omohyoid и кивательной мышц. Фасцию вокруг сонной оболочка удаляется, а проксимальный очного отделения изолированы от близлежащих блуждающего нерва и симпатических ганглиев с крючка. Внутренней сонной артерии, то обезболивающий укол использованием прижигание кончика. После прижигания, кожный разрез зашивается, и животное остается теплой окончательно проснулся и вернулся к плотине. Через час после перевязки, животное помещается в герметичную камеру переплетаются с азотом до уровня 6,0% O 2 не будет достигнут. Животное затем подвергаются до 35 мин гипоксии. После гипоксии экспозиции, мыши восстанавливается на грелку (33 ° C) в течение 30 мин, а затем возвращается к плотине. Для создания черепно-мозговая травма с комбинированной гипоксии / ишемии и инфекции / воспаление, животное затем вводили внутрибрюшинно с 0,015 мл липополисахарида (ЛПС, 1 мг / кг). Четыре дня post-hypoxia/ischemia, мышей под наркозом с косвенным охлаждением на льду на грани отсутствие реакции на вредные раздражители, то перфузии физиологическим раствором, а затем 4% параформальдегида. Мозги удаляются и cryoprotected. Рисунок 1. Характеристика травмы головного мозга в гипоксической / ишемической мышиной модели с H & E окрашивания. Существует очаговый некроз (стрелки) в коре головного белого вещества ипсилатеральной () для перевязки сонных, по сравнению с контралатеральной мозговой белом веществе (Б). Ипсилатеральная некроза и координационные микроинфаркты наблюдается в гиппокампе (C) и таламуса (D) в головном мозге с ипсилатеральной мозговой травмы белой материи. Представитель Результаты и рисунков: Мышь моделей ПВЛ при гипоксии / ишемии и / или инфекции / воспаления достигается за счет односторонней перевязки сонных последующим воздействием гипоксии и инъекции LPS. Мы определяем новые модели мышей в качестве подходящих моделей ПВЛ. Нейропатологических изучение корональных срезах, окрашенных гематоксилин-и-эозином (H & E) на протяжении всего переднего мозга показывает, очаговый некроз в центральном белом веществе полушария ипсилатерального на сонной перевязки (рис. 1А), с относительно щадящей нейронов в вышележащих коры головного мозга по сравнению с контралатеральной мозговой белого вещества (рис. 1В). В фокальной некротических белого вещества, есть заметное увеличение клеточности, состоящий из макрофагов и реактивные астроциты, как это характерно для человека координационного ПВЛ. В контралатеральной центрального белого вещества, олигодендроглиальных ядер, расположенных в пучковой типа расслоения; эта архитектура полностью нарушена очаговый некроз на ипсилатеральной стороне. Следует отметить, что мы также наблюдаем ипсилатерального некроза в гиппокампе (рис. 1в) и таламуса (фокусное микроинфаркты) (рис. 1D) в головном мозге с ипсилатеральной мозговой травмы белой материи. Человек ПВЛ также не происходит в полной изоляции от сопровождающих серых поражений вопрос. Отличительной чертой ПВЛ является относительной, хотя и не полная, не щадя коры головного мозга вышележащих ранения белое вещество – это функция, которая на наш взгляд, присутствует в нашей модели мыши. Рисунок 2. Скоринг масштаб для оценки 0-5 белых травмой вопросу MBP или O1 в мышиных моделях перивентрикулярной лейкомаляции. Наши модели показывают, мыши характеристики ПВЛ как на фенотипические и молекулярном уровнях. Мы использовали иммуноцитохимического обнаружения основному белку миелина (ОБМ) или O1-антигена для оценки повреждений, установили стандартную шкалу от 0 до 5 забить белый травмы вещества (рис. 2), и характеризуется патологии белого вещества (рис. . 3). Совсем недавно, беспристрастной стереологического анализа была выполнена для замены начальной полуколичественного метода. Кроме того, для проверки корреляционного эффектов белого травмы вещества на функциональные результаты, мы провели поведенческие тесты на моторные функции. Мы показали, что мыши выставку поразительный дефицит двигателя на P10-21 гипоксии следующие / ишемии плюс ЛПС на P6. Мы установили забив критерии со шкалой 0-4 для определения дисфункции контралатеральной конечности у мышей ранения на P10-21. Как правило, нормальных мышей может носиться до 30 ° наклон (4 балла) и подняться вверх 45 ° наклон без скольжения (оценка 3). Травмированные мыши имеют более низкие оценки в соотношении с степенями белой травмы вопросе. Рисунок 3. Характеристика белых травмой вопросу MBP или O1 окрашивания и миелина структуры с помощью электронного микроскопа (EM). MBP и O1 окрашивания показать миелина потере в коре головного белого вещества ипсилатерального для труб, по сравнению с контралатеральной белым веществом. Е. М. рассмотрение показывает, миелинизированных аксонов в белом веществе мозговой контралатеральной для перевязки и выродились ткани в ипсилатеральной белым веществом. Мы ожидаем, что создание новых моделей мышей ПВЛ позволит нам изучить конкретные механизмы PVL-подобные повреждения незрелый мозг. Мы будем решать вопрос патогенеза использованием трансгенных линий мышей, чтобы изучить роль отдельных молекул интереса и оценить цели нейропротекции.