עכבר מודלים של לויקומלציה periventricular
Summary
הקמנו מודלים של העכבר לויקומלציה periventricular (PVL), את הפגיעה במוח השולט על פגים מאופיין periventricular נגעים בחומר הלבן. היפוקסיה / איסכמיה עם / בלי זיהום מערכתי הם הגורמים העיקריים של PVL. קשירת הראש חד צדדית וחשיפה היפוקסיה עם / בלי זריקה lipopolysaccharide יוצר PVL כמו נגעים בעכברים P6.
Abstract
אנו מתארים פרוטוקול להקמת מודלים העכבר של לויקומלציה periventricular (PVL). PVL היא הצורה הדומיננטית של פגיעה מוחית על פגים לבין מקדימים הנפוץ ביותר של שיתוק מוחין. PVL מתאפיינת נזק periventricular החומר הלבן עם פציעה oligodendroglial בולט. היפוקסיה / איסכמיה עם או ללא זיהום דלקת מערכתית / הם הגורמים העיקריים של PVL. אנו משתמשים בעכברים P6 כדי ליצור מודלים של פגיעה מוחית בילוד ידי אינדוקציה של היפוקסיה / איסכמיה עם או ללא זיהום דלקת מערכתית / עם קשירת הראש החד צדדית ובעקבותיה החשיפה היפוקסיה עם או בלי זריקה של lipopolysaccharide רעלן פנימי (LPS). אימונוהיסטוכימיה של חלבון המיאלין הבסיסי (MBP) או O1 ו בדיקה מיקרוסקופית אלקטרונים להראות אובדן המיאלין בולט החומר הלבן במוח עם נזק נוסף בהיפוקמפוס, התלמוס. הקמת מודלים העכבר של PVL יהיה מאוד להקל על מחקר של הפתוגנזה במחלה באמצעות זמין זנים עכבר מהונדס, הולכה של ניסויים התרופה באופן תפוקה גבוהה יחסית לזהות סוכני מועמד טיפולית, ובדיקה של השתלת תא גזע באמצעות זנים העכבר כשל חיסוני.
Protocol
Discussion
פגיעה במוח המתפתח מוביל לתוצאות הרסניות נוירולוגיות. באופן מפתיע, את דפוס של פגיעה מוחית סביב הלידה הוא מאוד תלויי גיל. אצל תינוקות טווח, זה בעיקר משפיע על קליפת המוח עם איבוד עצבי אופייני. עם זאת, פגים, זה משפיע באופן סלקטיבי החומר הלבן במוח עם פגיעה בולט oligodendrocytes בפיתוח, הפרעה המכונה לויקומלציה periventricular (PVL). עוצמת הבעיה של פגיעה מוחית אצל התינוק בטרם עת הוא יוצא דופן. מסירה מוקדמת ומשופרת לטיפול נמרץ בילוד הובילו כמעט 90% של הישרדות של 13 מיליון פגים ברחבי העולם (כ 56,000 בארצות הברית) נולד שנתי עם משקל לידה מתחת 1500 גרם, כלומר מאוד נמוך משקל לידה ותינוקות. כ -10% מכלל הניצולים לאחר מכן התערוכה שיתוק מוחין כ -50% יש ליקויים קוגניטיביים והתנהגותיים. PVL המוח החשוב ביותר הפתולוגיה שיתוק מוחין הבסיסית פגים. אין טיפול ספציפי עבור PVL כיום קיים, בין השאר משום בפתוגנזה לא הובן היטב 1,2.
למרות האטיולוגיה של PVL היא multifactorial, הלידה היפוקסיה / איסכמיה עם זיהום אימהי תוך רחמי נחשב הגורם העיקרי PVL. מודל hypoxic / איסכמי של PVL בחולדה ב P7 כבר נקבעה בעבר 3. מודל זה הוא ייחודי בכך שהוא דומה PVL ב פגים. סימן ההיכר של הדגם הזה הוא עניין סלקטיבי לבן פתולוגיה, בניגוד למרבית הדגמים שבץ המאופיינים לאוטם החומר האפור. עם זאת, מגבלות המודל hypoxic-איסכמי של החולדה לא צריך להתעלם. ראשית, האטיולוגיה של PVL הוא multifactorial לעיתים קרובות. בנוסף לדלקת היפוקסיה / איסכמיה, אימהית, העובר זיהום / הוא קשור מאוד עם PVL. לפיכך, דלקת היפוקסיה / איסכמיה זיהום / משולב עלול ליצור מודלים נוספים PVL דמוי. הגיל מכרסם בצורה הטובה ביותר בקורלציה עם תקופת ההתפתחות האנושית של הסיכון הגדול ביותר עבור PVL נגעים (24-32 שבועות של הריון) הוא כי לאחר הלידה בידול oligodendroglial הוא בעיקר אירוע הלידה במכרסמים. כפי שאי אפשר לייצר זיהום אימהי, העובר / דלקת הגילאים לאחר הלידה, יהיה זה סביר כדי לדמות זיהום בשלב רלוונטי התפתחותי לאחר הלידה כדי ליצור מודל של מכרסם PVL. יש לנו ניסו לשלב הזרקת LPS עם המודל hypoxic / איסכמי בעכברים ב P6, כדי לייצר נגעים PVL רלוונטית יותר מבחינה קלינית. שנית, גישה אופטימלית הוכחה של קונספט ניסיוני תפקיד סיבתי של מולקולה מחייב את השימוש של העכברים הטרנסגניים, מניפולציות גנטיות הן הרבה יותר בחולדה מאשר העכבר. לכן, יש ביקשו להמיר מודל ניסיוני שלנו PVL מן החולדה על העכבר.
מודלים של עכבר PVL יהיה מאוד להקל 1) את המחקר של הביולוגיה מחלות בפתוגנזה שימוש זמין זנים עכבר מהונדס; 2) הולכה של התרופה בניסויים כדי לגלות סוכנים מועמד עם פוטנציאל טיפולי; 3) בדיקות של כלי בתאי גזע באמצעות זנים עכבר immunodeficient.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו היא חלק נתמך על ידי מענקים מן המכונים הלאומיים לבריאות (RO1 NS059043 ו RO1 ES015988), טרשת נפוצה האגודה הלאומית, רוש קרן מחקר אנמיה, פלדשטיין רפואי הקרן, ו שריינרים חולים לילדים.
ברצוננו להודות תענוג ד"ר דוד הצעות שלו. עבודה זו הייתה חלק נתמך על ידי מענקים ל WD מן המכונים הלאומיים לבריאות (RO1 NS059043 ו RO1 ES015988), החברה הלאומית טרשת נפוצה, ו שריינרים חולים לילדים. אנו מצהירים שום אינטרסים מתחרים הקשורים במאמר זה.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| LPS | Sigma | L4130 | ||
| Hypoxia Chamber | BioSpherix | A-30274 | ||
| Surgical hook | F.S.T. | 10064-14 |
References
- Volpe, J. J. . Neurology of newborn. , 217-276 (2001).
- Deng, W., Pleasure, J., Pleasure, D. Progress in periventricular leukomalacia. Arch. Neurol. 65, 1291-1295 (2008).
- Follett, P. L., Deng, W., Dai, W., Talos, D. M., Massillon, L. J., Rosenberg, P. A., Volpe, J. J., Jensen, F. E. Glutamate receptor-mediated oligodendrocyte toxicity in periventricular leukomalacia: a protective role for topiramate. J. Neurosci. 24, 4412-4420 (2004).
