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Fluorimétrie à balayage nano-différentiel pour le criblage dans la découverte de plomb à base de fragments
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Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
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Fluorimétrie à balayage nano-différentiel pour le criblage dans la découverte de plomb à base de fragments

français

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May 16, 2021

DOI:

10.3791/62469-v

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10.3791/62469-v

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06:26 min
May 16, 2021

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1Oncode Institute and Division of Biochemistry,the Netherlands Cancer Institute, 2Institute for Organic Chemistry and Chemical Biology, Center for Biomolecular Magnetic Resonance (BMRZ),Johann Wolfgang Goethe-University

Summary

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La surveillance des changements dans la température de fusion d’une protéine cible(c.-à-d.essai de décalage thermique, TSA) est une méthode efficace pour filtrer les bibliothèques de fragments de quelques centaines de composés. Nous présentons un protocole TSA mettant en œuvre la fluorimétrie à balayage nano-différentiel assistée par robotique (nano-DSF) pour surveiller la fluorescence intrinsèque du tryptophane et la rétrodiffusion de la lumière pour le criblage des fragments.

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Nano-differential Scanning FluorimetryFragment-based Lead DiscoveryProtein SampleLigand ScreeningFragment PlateProtein PlateNano DispenserDeck ConfigurationFragment DispensingProtein Sample Preparation

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Ahmad, M. U. D., Fish, A., Molenaar, J., Sreeramulu, S., Richter, C., Altincekic, N., Schwalbe, H., Wienk, H., Perrakis, A. Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery. J. Vis. Exp. (171), e62469, doi:10.3791/62469 (2021).

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