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Fluormetria de varredura nano-diferencial para triagem em descoberta de chumbo baseada em fragmentos
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Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery

Fluormetria de varredura nano-diferencial para triagem em descoberta de chumbo baseada em fragmentos

português

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06:26 min

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May 16, 2021

DOI:

10.3791/62469-v

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May 16, 2021

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1Oncode Institute and Division of Biochemistry,the Netherlands Cancer Institute, 2Institute for Organic Chemistry and Chemical Biology, Center for Biomolecular Magnetic Resonance (BMRZ),Johann Wolfgang Goethe-University

Summary

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Monitorar mudanças na temperatura de fusão de uma proteína alvo (ou seja,ensaio de mudança térmica, TSA) é um método eficiente para triagem de bibliotecas de fragmentos de algumas centenas de compostos. Apresentamos um protocolo TSA implementando fluoremetria nano-diferencial assistida por robótica (nano-DSF) para monitorar fluorescência triptofano intrínseca e dispersão de costas leves para triagem de fragmentos.

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Nano-differential Scanning FluorimetryFragment-based Lead DiscoveryProtein SampleLigand ScreeningFragment PlateProtein PlateNano DispenserDeck ConfigurationFragment DispensingProtein Sample Preparation

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Ahmad, M. U. D., Fish, A., Molenaar, J., Sreeramulu, S., Richter, C., Altincekic, N., Schwalbe, H., Wienk, H., Perrakis, A. Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery. J. Vis. Exp. (171), e62469, doi:10.3791/62469 (2021).

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