Модель администрирования Galleria mellonella устные Innate иммунных реакций Study Commensal-Induced

Кишечная микрофлора является важным компонентом для поддержания гомеостаза и включает как врожденного и адаптивного иммунного ответа^1,2. Синантропных микробиоты сообщество характеризуется различными основными составляющими синантропных: симбионтами, которые наделяют благотворное влияние важных иммуномодулирующих функций, и pathobionts, что может иметь пагубные последствия генетически предрасположены размещает и поощрения и вызвать кишечные воспаления^3,4. Многие исследования симбионтами и pathobionts и их влияние на хост иммунной системы были опубликованы главным образом изучение адаптивного иммунного ответа.

Поскольку эти исследования включают много животных для расследования и защиты и замены животных, используемых для экспериментов повышения общественного интереса, мы стремимся найти замену модель позволяет для скрининга различных бактериальных иммуногенность Свойства. Насекомые, особенно Galleria mellonella, являются широко используется замена модели в исследованиях инфекции. G. mellonella сочетает в себе различные преимущества, такие как низкая стоимость и высокая пропускная способность; Это позволяет перорального введения бактерий, которая является естественной подверженности валютному риску маршрут, и он позволяет системной инфекции^5,6. G. mellonella далее позволяет инкубации при 37 ° C, который является температура физиологических тела млекопитающих и оптимальной для бактериальных вирулентности фактор выражение⁵. Основным преимуществом G. mellonella является сохраняемой врожденной иммунной системы, которая позволяет дискриминацию себя от несамоуправляющихся и кодирует различных рецепторов шаблон признание как apolipophorin или опсонин hemolin^{6, 7}. после признания микроба, G. mellonella может вызвать различные течению гуморального иммунного ответа. Это может вызвать реакции окислительного стресса и выделяют реактивнооксигенных видов (ров), который включает в себя деятельность нос (азотная оксидазы синтетазы) и NOX (NADPH оксидаза)^6,8. Кроме того, G. mellonella активирует ответ мощным антимикробные пептид (AMP), что приводит к секреции смесь различных усилителей, например gloverin, moricin, цекропин или дефенсина как gallerimycin^{6, 8,9,10}. Как правило усилители имеют довольно широкий принимающей специфику против грамположительных и грамотрицательных бактерий и грибков и должны предоставить мощный ответ, поскольку насекомых хватает каких-либо адаптивный ответ¹⁰. Gloverin является AMP, активен против бактерий и грибков и тормозит формирование внешней мембраны^6,11. Moricins выставку их антимикробной функция против грамположительных и грамотрицательных бактерий, проникая мембраны и формировании порового^9,11. Cecropins обеспечивают деятельность против бактерий и грибков и разрушения мембраны аналогично как moricins^9,10. Gallerimycin – это пептид дефенсина как с противогрибковыми свойствами⁹. Интересно, что было установлено, что сочетание цекропин и gallerimycin имеют синергетический активность против E. coli¹⁰.

Из-за их легкой в использовании символов G. mellonella личинки являются инфекции часто используется модель для оценки бактериальных патогенности. В частности исследования, в которых данные, полученные из G. mellonella коррелируют с данными, полученными от мышей поддержки сила этой модели альтернативного размещения. Было установлено, что наиболее патогенных серотипов Listeria моноцитогенес в мышиной модели инфекции приведет также к более высокой смертности в G. mellonella после системной инфекции. Кроме того менее вирулентные серотипов оказался также менее вирулентные в G. mellonella модель¹². Аналогичные замечания были сделаны с человека патогенных грибов Candida albicans. Вирулентность из различных C. albicans штаммов была проведена системной инфекции и последующий мониторинг личиночной выживания. Мышь avirulent штаммы были также avirulent или выставлены снижение вирулентности в G. mellonella, в то время как мыши вирулентных штаммов приведет также к высокой смертности личиночной¹³. G. mellonella модель может далее использоваться для идентификации типа 3 секрецию системы факторов патогенности Pseudomonas aeruginosa¹⁴.

Поскольку большинство расследований с участием G. mellonella были сосредоточены на факторы вирулентности, используя подход системной инфекции мы были особенно заинтересованы в предоставлении метода для анализа кишечных Комменсалами в устной кормление модель, в которой мы можем применить собственный дозировка бактерий на личинки и не только наблюдать личиночной смертности но анализировать различные клейма innate иммунных реакций для поддержания гомеостаза кишечника.

Наш метод помогает увеличить использование G. mellonella как замена модели, так как мы сочетаем применение бактерий и анализ выражения RNA. Это не только полезно для укрепления смысл исследования бактериальной патогенеза, когда включая анализ иммунных реакций после перорального и не только наблюдение за смертности после системной инфекции. Наши методы позволяет для анализа иммуногенные свойства бактериальных непатогенные Комменсалами, поскольку это обеспечивает более сложные условия, чем культуры клеток, предлагая кишечный барьер в живом организме.