Análise de Linfócitos extravasamento Usando um<em> In Vitro</em> Modelo do Sangue-Cérebro humano Barreira

migração de linfócitos a partir do sangue para os tecidos é crucial para a vigilância imunitária. Uma sequência de interacções moleculares específicos assegura extravasamento local específico para o intestino delgado, de pele, nódulos linfáticos, o sistema nervoso central (CNS), e outros tecidos ^1. Alterações na migração de linfócitos estão envolvidos na patofisiologia de uma série de doenças ampla disseminação ^2. Migração para o SNC imuno-privilegiado é fortemente regulada e, consequentemente, alterações deste processo estão envolvidos em doenças relacionadas com o SNC, como encefalomielite ^3, neuromielite óptica, acidente vascular cerebral, e esclerose múltipla (MS), ^{2, 4, 5, 6, 7.} Portanto, é importante estudar o extravasamento de linfócitos para melhor compreender a fisiopatologia da doença e desenvolver ferramentas para uma melhoramento da doença de carga ^{8, 9, 10, 11, 12.}

Os linfócitos migra para o SNC através de rotas distintas. Extravasamento através de vénulas pós-capilares para o espaço subaracnóide através da barreira sangue-fluido cerebrospinal dentro do plexo coróide e através da barreira sangue-cérebro ter sido descrito ^{um, 13, 14, 15.} Migração através da barreira sangue-cérebro é conduzida pela interacção de linfócitos com células endoteliais ^14. Em contraste com as células endoteliais na periferia, as células endoteliais do SNC expressar quantidades elevadas de moléculas de juno apertadas, assim limitar rigorosamente a quantidade de células e proteínas capazes de atravessar a barreira sangue-cérebrolass = "xref"> 16. Inflamação resulta em afrouxamento de junções apertadas e induz a expressão de moléculas de adesão; assim, aumentando a migração de linfócitos para o SNC ^{1, 17, 18.}

Extravasamento através da barreira sangue-cérebro é um processo de múltiplos passos. Linfócitos do tirante para as células endoteliais e, em seguida, rolar ao longo do endotélio em um processo mediado principalmente por selectinas ^{1, 15.} Posteriormente, as interacções entre as quimioquinas segregadas pelo endotélio e os respectivos receptores de quimiocinas expressas em linfócitos induzir mudanças conformacionais de integrinas, promovendo assim a adesão firme para as células endoteliais ^1. Finalmente, quer linfócitos de rastreamento ao longo da barreira endotelial contra o fluxo de sangue antes transmigrando para o espaço perivascular, ou parar imediatamente e directamente transmigrate no local da empresa ^de aderência ^{1, 19, 20.} Todos estes passos de extravasamento de linfitos pode ser analisada in vitro utilizando técnicas distintas ^21. Microscopia de lapso de tempo vídeo é usado para estudar o tethering inicial e rolando ^15. Os ensaios de adesão fornecem informações detalhadas sobre a prisão firme endoteliais barreiras ^22. Os ensaios de transmigração como demonstrado aqui permitem a análise de transmigração de células imunes ^{21, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29.}

Usando o modelo humano in vitro barreira hematoencefálica, que recentemente poderia mostrar que uma maior migrAtory capacidade de CD56 CD16 ^{brilhante dim / –} células NK em comparação com o seu CD56 ^dim CD16 ⁺ homólogos foi reflectida por uma predominância deste subconjunto de células NK no compartimento ²¹ intratecal. Assim, a instalação experimental parece ser adequado para mimetizar a situação in vivo.