Remendo Recordings Grampo na Intact gânglios das raízes dorsais de ratos adultos

Sensation é essencial para a sobrevivência e bem-estar de um organismo. A transmissão de estímulos é dependente das vias sensoriais a partir de terminações periféricas dos axónios de neurónios sensoriais primários. neurónios sensoriais primários, com a excepção de o núcleo mesencefálico do nervo trigeminal, situam-se nos gânglios da raiz dorsal e gânglios trigeminais (DRG). Eles servem como guardiões da informação sensorial ^1. Na membrana perikarial, assim como nos terminais centrais e periféricos, os neurônios DRG expressam receptores e canais iônicos, tais como receptores de glutamato, os receptores alfa de TNF, receptor de potencial transitório canal cátion membro da subfamília V 1 (TRPV1), canais de sódio, etc. ^{2 -7.} gravações de patch clamp da membrana perikarial permitir compreender alterações funcionais de muitos destes receptores e canais ao longo do neurónio.

A técnica de gravação de patch-clamp é uma ferramenta poderosa para stumorrendo as actividades dos canais ou receptores e um grande número de estudos foram realizados por aplicação da presente técnica em neurónios DRG ^8-10. Na maioria dos estudos, o DRG é removido através do corte das radículas dorsais e nervo perto da coluna vertebral para o gânglio. Após a trituração, o gânglio é, então, colocado em enzimas digestivas que resultam na dissociação dos neurónios DRG, que podem então ser gravados imediatamente ou cultivadas durante vários dias antes da gravação. Infelizmente, a dissociação dos neurônios DRG envolve uma axotomia necessário perto do pericários. Uma vez dissociados e axotomia, os neurônios DRG sofrer alterações fenotípicas, bem como alterações na excitabilidade da membrana ^11,12. A perda de contato entre o pericários de neurônios individuais e as células gliais por satélite que normalmente cercam deles é susceptível de contribuir para estas mudanças ^13. O crosstalk entre os neurônios e células gliais por satélite é tanto essencial em condições fisiológicas e na adaptação às pathologcondições políticas, tais como as que podem causar dor intratável ^14,15. Seria um desafio para estudar a interação entre os neurônios e células gliais por satélite usando uma preparação DRG dissociada.

DRGs intacto, por outro lado, fornecer aproximar das condições in vivo. Nos últimos anos, nosso laboratório, bem como alguns outros grupos, tem vindo a utilizar DRGs intactas de ratos adultos para investigar mudanças de neurônios sensoriais primários em diferentes condições associadas com dor crônica ^{3-5,11,15-17.} Embora as técnicas utilizadas nestes estudos são relativamente estabelecido, uma descrição passo-a-passo não foi ainda publicada. No presente artigo, são apresentadas uma maneira conveniente e rápido para preparar DRGs intactas e sua utilização para gravações patch clamp.