Fare Genital Sistemlerinin Mukozanin gelen Lenfosit İzolasyonu
Summary
Fare genital lenfosit yalıtmak için verimli bir şekilde tarif edilmiştir. Bu yöntem verimli izolasyonu sağlamak için enzim sindirim ve Percoll degrade ayrılık yararlanır. Bu teknik, diğer tür kullanım için de uyarlanabilmektedir
Abstract
, Gastrointestinal ürogenital ve solunum yolları, bu tür virüs ve bakteri gibi patojenlerin 1 için giriş portalları sağlamak dahil Mukozal yüzeyler. Mucosae gibi bağırsak Peyers yamalar ve solunum yollarında nazal ilişkili lenforetiküler doku gibi patojenlere karşı bağışıklık oluşturmak için de konak endüktif sitelerdir. Bu benzersiz özellik, konak savunma sisteminin önemli bir oyuncu olarak mukozal bağışıklık getiriyor. Birçok çalışma, gastrointestinal ve solunum mukoza alanlarında odaklanmıştır. Ancak, üreme mukozal siteleri küçük bir araştırma olmuştur. Genital mukoza bakteriyel ve viral enfeksiyonlar dahil olmak üzere cinsel yolla bulaşan hastalıklar (STD) için primer enfeksiyon sitedir. CYBH, bugün dünyanın karşı karşıya olduğu en önemli sağlık sorunlarından biridir. Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri Amerika Birleşik Devletleri'nde 19 milyon yeni enfeksiyon her yıl olduğunu tahmin ediyor. AzizDs her yıl 2 ABD sağlık sistemi 17000000000 $ maliyeti ve acil ve yaşam boyu sağlık sonuçlarının maliyet bireyler daha. Bu meydan yüzleşmek için, üreme mukozal bağışıklık daha büyük bir anlayış gerekli ve lenfositler izole bu çalışmaların önemli bir bileşenidir. Burada, tekrarlanabilir diğer türlere adaptasyon için modifiye edilebilir immünolojik çalışmalar için fare dişi genital yollarında gelen lenfositler izole etmek için bir yöntem mevcut. Aşağıda tarif edilen yöntem, bir fare dayanmaktadır.
Protocol
Discussion
Bu protokolde, fare genital yolları lenfosit hazırlamak için nasıl gösterilir ve kolayca hakim. Bu sürecin en kritik nokta buz üzerinde hücreleri tutarak hücre canlılığını muhafaza etmektir. Bu yöntem hücre verimi beceri, fare enfeksiyon durumu (saf ya da enfeksiyon sonrası gün), patojen (bakteriyel, viral, fungal) ve fare üreme sisteminin irdelenmesi bölümünde (yumurtalık, rahim, işleme, tekniği bağlıdır vajinal segment veya tüm genital sistem). Bizim grup ve diğerleri 5-7 fare …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz finansman hibe R01-AI026328 (KAK) ve R01-AI079004 (KAK) için NIH teşekkür.
Materials
| Name | Company | Catalogue number | |
| Collagenase | Sigma Life Sciences | C2139-1G | |
| Percoll | GE Healthcare Bio-Sciences | 17-0891-01 | |
| RPMI1640 | Gibco by Life Technologies | 11875 |
References
- M, . The impact of perinatal immune development on mucosal homeostasis and chronic inflammation. Nat. Rev Immunol. 12, 9-23 (2011).
- Centers for Disease Control and Prevention. . 2010 Sexually Transmitted Diseases Surveillance. , (2010).
- Jain, S., Patrick, A. J., Rosenthal, K. L. Multiple tandem copies of conserved gp41 epitopes incorporated in gag virus-like particles elicit systemic and mucosal antibodies in an optimized heterologous vector delivery regimen. Vaccine. 28, 7070-7080 (2010).
- Tang, V. A., Rosenthal, K. L. Intravaginal infection with herpes simplex virus type-2 (HSV-2) generates a functional effector memory T cell population that persists in the murine genital tract. J. Reprod. Immunol. 87, 39-44 (2010).
- Gillgrass, A. E., Tang, V. A., Towarnicki, K. M., Rosenthal, K. L., Kaushic, C. Protection against genital herpes infection in mice immunized under different hormonal conditions correlates with induction of vagina-associated lymphoid tissue. J. Virol. 79, 3117-3126 (2005).
- Sajic, D., Patrick, A. J., Rosenthal, K. L. Mucosal delivery of CpG oligodeoxynucleotides expands functional dendritic cells and macrophages in the vagina. Immunology. 114, 213-224 (2005).
- Jiang, J. Q., Patrick, A., Moss, R. B., Rosenthal, K. L. CD8+ T-cell-mediated cross-clade protection in the genital tract following intranasal immunization with inactivated human immunodeficiency virus antigen plus CpG oligodeoxynucleotides. J. Virol. 79, 393-400 (2005).
- Gill, N., Chenoweth, M. J., Verdu, E. F., Ashkar, A. A. NK cells require type I IFN receptor for antiviral responses during genital HSV-2 infection. Cell Immunol. 269, 29-37 (2011).
- Thatte, A., DeWitte-Orr, S. J., Lichty, B., Mossman, K. L., Ashkar, A. A. A critical role for IL-15 in TLR-mediated innate antiviral immunity against genital HSV-2 infection. Immunol. Cell Biol. 89, 663-669 (2011).
- Kwant-Mitchell, A., Ashkar, A. A., Rosenthal, K. L. Mucosal innate and adaptive immune responses against herpes simplex virus type 2 in a humanized mouse model. J. Virol. 83, 10664-10676 (2009).
- Gallichan, W. S., Rosenthal, K. L. Effects of the estrous cycle on local humoral immune responses and protection of intranasally immunized female nice against herpes simplex virus type 2 infection in the genital tract. Virology. , 224-487 (1996).
