Preparação e Utilização de lesões Fantasma à Prática biópsias aspirativa por agulha fina

Preparação de lesão fantasma (phantom preparar cerca de 38 a 48 horas antes da sessão prática real da FNA proficiência (Figura 1) ou utilizar pronto para usar 'AV Fantasma "da FNA Fonte, EUA. A lesão fantasma (armazenadas sob refrigeração sem congelar) pode ser mantido, mesmo preparado 3-4 dias antes da prática da sessão. Praticando FNA proficiência: Embora tenhamos demonstrado o procedimento usando THFV Shidham do (Tissue Harvester com válvula Funcional) (FNA Fonte, EUA), qualquer sistema FNA podem ser utilizados outros para a prática (Figura 2). Divulgação e processamento do aspirado em lâmina de vidro (Figura 3). Material necessário Claro silicone para calafetar disponível em muitas lojas de construção / home melhoria. Muitas marcas estão disponíveis, incluindo DAP GETM, Red Devil, White Lightning, e as marcas da cadeia local. Usamos borracha de silicone transparente, Produtos White Lightning, Cleveland, Ohio, EUA, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html ) Pistola de calafetagem Um pedaço de folha de plástico (usamos Saran Cling Além disso Wrap, SC Johnson & Son Inc, Racine, WI, EUA http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp Luvas de látex Bananeira diâmetro largo ou salsicha. Firme e liso placa de base (cerca de 6 polegadas X 6 polegadas) feitas de tábua de cartão de espessura, placa de acrílico, ou outros. FNA realizando equipamentos 25 agulhas hipodérmicas THFV Shidham (ou outros componentes para a realização de FNA) lâminas de vidro kits de coloração Passo-a-passo os detalhes A. Preparação de lesão fantasma (phantom preparar 1-2 dias antes de praticar FNA proficiência (Figura 2) ou utilizar pronto para usar 'AV Fantasma "da FNA Fonte, EUA. Cortar uma 6 X 6 polegadas de tamanho apoio bordo. Corte um segmento de 2,5 polegada de comprimento de 'core lesão fantasma' (banana ou salsicha). Expulsar 0,5 polegada de espessura da camada de calafetar na placa de base. Pressione o 'fantasma lesão core' levemente para esta camada de calafetar. Adicione mais caulk sobre o "núcleo lesão fantasma 'de modo que é totalmente incorporado no monte de calafetar, sem bolhas de interceptação. Ajustar e moldar a calafetação mais "núcleo lesão fantasma 'com a mão enluvada. Dê uma 6 X 6 polegadas de tamanho pedaço filme plástico e cobrir o monte de calafetar e ajustar a superfície do monte em uma configuração convexa lisa com uma mão, limpa enluvadas. Deixe a cura monte calafetar por 6-8 horas a mais do que o tempo de cura mencionados sob as instruções do produto, (geralmente 24 horas), em local aquecido. Após a cura, a calafetação deve ser firme, eo filme plástico pode ser retirada facilmente. A FNA lesão fantasma está pronto para ser usado para praticar o procedimento FNA após cerca de 8 horas, quando o monte inteiro de calafetar estar completamente curado do centro contendo o "núcleo lesão fantasma '(banana ou salsicha). B. Praticar FNA proficiência na AV lesão Phantom. Qualquer abordagem na obtenção de alta qualidade, aspirados adequados FNA com boa qualidade esfregaços citológicos direta devem seguinte endereço pontos críticos de- O medidor de-agulha como implícita no título do procedimento, as agulhas mais finas (número maior calibre) aspirados rendimento melhor com diluição do sangue mínima. Para balanço crítico dos benefícios e limitações, 22-25 agulhas são preferidos para ótima estabilidade mecânica da agulha sem afetar a qualidade aspirar FNA. Controlar sequências apropriadas na aplicação de vácuo e solte durante a FNA procedimento Isso é fundamental para avançar as células da amostra em cada curso da agulha, em direção ao centro da agulha. No entanto, o material aspirado não deve ser permitido chegar até a área do conjunto de punção aspirativa por agulha com seringa. Se isso não for evitado, o material pode ser difícil de recuperar para a tomada de esfregaços (este material pode, no entanto, ser usado para a preparação de blocos de células ou de métodos de concentração, como Cytospin, métodos de filtro, ou recentes líquido preparações de citologia based). Desenvolver habilidade apropriada no processamento do espécime aspirado, incluindo a preparação do exame direto e on-site de avaliação de adequação, com triagem adequada para exames complementares, tais como células-bloco preparação para imunocitoquímica eletivo, citometria de fluxo eletivo para imunofenotipagem de lesões linfoproliferativas, submetendo passes estéreis para microbiologia estudos, mate erial para testes molecular (citogenética, etc.) Ba Performing FNA procedimento (mostrado com THFV Shidham [1] (FNA Fonte, EUA), no entanto, qualquer sistema FNA podem ser utilizados outros para a prática). (Figura 3,4,5). Prepare a montagem FNA com a válvula fechada. Localizar a lesão e inserir a ponta da agulha na lesão. Abrir a válvula para ligar o vácuo, através da agulha até a sua ponta, para aspirar representante componentes celulares da lesão em cada lado para o outro curso na lesão. Manter as áreas de vácuo e amostras diferentes da lesão através da inserção da agulha na lesão em diferentes direções. Fechar a válvula para desligar o vácuo no lúmen da agulha. Equalizar a pressão com condições ambientais (por exemplo, desligar o Seringa válvula da agulha por um breve momento e reconectar. Se o dispositivo especial com passos inbuilt, como 'THFV' é usado, este e outros passos de Ba1 através BA6 estão concertados automaticamente seguindo diferentes etapas do sistema de válvulas) [1]. Retire a agulha da lesão com a válvula fechada, a fim de evitar a perda da amostra por ação capilar na lesão a menos que haja pressão ligeiramente negativa no final hub. Desalojar o conteúdo aspirado para a lâmina de vidro para preparar esfregaço direto (veja abaixo) (figura 6). Bb Processing. Da amostra aspirado com triagem adequada Espalhando a aspirar a lâminas de vidro e preparar esfregaço de boa qualidade direto (Figura 6), seguido de coloração adequada e triagem (Figura 7,8). Uma gota de aspirado de desalojados na lâmina de vidro é transmitida por uma variedade de abordagens, como mostrado na (Figura 6) [2]. A abordagem usual é 'a'. No entanto, se a amostra é sangue diluído com alguns microfragmentos, o excesso de sangue é drenada inclinando a lâmina, ea microfragmentos então estão espalhados entre este slide e lâmina de vidro segundo semelhante a 'a'. Se a aspiração é predominantemente uma suspensão sem microfragmentos, como de lesões linfoproliferativas, é semelhante a se espalhar 'b' ou 'c'. As manchas podem ser processados ​​e fixo em uma variedade de maneiras para diferentes métodos de coloração no local durante a avaliação da adequação. No entanto, a melhor abordagem é secar todos os esfregaços. Os esfregaços secos ao ar pode ser manchado com manchas Romanowski (como Difff-Quik mancha, mancha Wright) após a fixação com metanol ou Pap mancha após a reidratação-salina e pós-fixação (em etanol 95% ou, de preferência em etanol 95% com 5 % de ácido acético) [3]. Eliminação da interferência devido ao sangue obscurecendo é um benefício significativo [3]. Dependendo dos resultados iniciais cytomorphologic no local durante a avaliação da adequação, triagem adicionais (como bloco de celas eletivo, microscopia eletrônica, as culturas de microbiologia, citometria de fluxo, citogenética molecular-testes, etc) é recomendada, como indicado. Resultados representativos: Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 1 . Figura 1. Material necessário para a preparação AV Fantasma para a prática de FNA proficiência (* Usamos Saran plástico que não aderir ao calafetar no final, durante a remoção após a cura completa da calafetar.) Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 2. Figura 2. Preparando AV lesão Fantasma Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 3. Figura 3. Etapas críticas no processo de FNA. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 4. Figura 4. EUS-FNA Resumo dos passos críticos * (ver Fig. 3) Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 5. Figura 5. Armadilhas relacionadas com as etapas críticas na FNA procedure. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 6. Figura 6. Preparação de esfregaços diretos de FNA espécime entre dois slides. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 7. Figura 7. Wet manchas fixo versus Air-dried. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 8. Figura 8. Wet manchas fixo versus Air-dried.