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인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 게놈 수정 생성
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Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells
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Click here for the English version.
인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 게놈 수정 생성
DOI:
10.3791/60085-v
•
09:04 min
•
September 25, 2019
•
Fabian L. Cardenas-Diaz*
1
,
Jean Ann Maguire*
1
,
Paul Gadue
2,3
,
Deborah L. French
2,3
1
Center for Cellular and Molecular Therapeutics
,
The Children’s Hospital of Philadelphia
,
2
Department of Pathology and Laboratory Medicine
,
The Children’s Hospital of Philadelphia
,
3
Department of Pathology and Laboratory Medicine
,
University of Pennsylvania
Chapters
00:04
Title
01:19
Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
03:50
Clone Screening
04:51
Transfection Setup
06:07
Checking for Mutations in Single Colonies
07:11
Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
08:10
Conclusion
Summary
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이 프로토콜은 인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 이형 이형 또는 동형접합 뉴클레오티드 변화의 생성을 용이하게 하는 방법을 제공한다.
Tags
CRISPR-Cas9
Human Pluripotent Stem Cells
Isogenic Lines
Heterozygous Mutations
Gene Function
Disease Modeling
Colony Picking
Fluorescence-activated Cell Sorting
MEFs
ROCK Inhibitor
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