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使用哺乳动物细胞中的微球菌核酸酶进行染色质免疫沉淀测定

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Chromatin Immunoprecipitation Assay Using Micrococcal Nucleases in Mammalian Cells

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使用哺乳动物细胞中的微球菌核酸酶进行染色质免疫沉淀测定

DOI:

10.3791/59375-v

•

11:42 min

•

May 10, 2019

•

Takahiro Yamakawa, Keiichi Itakura

¹Department of Molecular and Cellular Biology,Beckman Research Institute of City of Hope

Chapters

00:04Title
00:38Determination of MNase Digestion Conditions
04:06Reverse Crosslinking, Purification of DNA, and Analysis of Digested Chromatin
06:33Chromatin Immunoprecipitation
09:24Results: Representative Microphotographs, Agarose Gel Analysis, and Occupancy in the AR Genome
10:42Conclusion

Summary

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染色质免疫沉淀(ChIP)是了解基因调控的分子机制的有力工具。然而,该方法在通过机械剪切获得可重复染色质碎片方面遇到了困难。在这里,我们为使用酶消化的ChIP测定提供了改进的协议。

Tags

Chromatin Immunoprecipitation Micrococcal Nucleases Mammalian Cells Transcriptional Regulation Molecular Mechanisms Crosslinking Glycine Cell Lysis MNase Digestion Sonication

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