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Isolamento de Proteínas de Filamento Intermediário a partir de Tecidos Múltiplos de Rato para Estudar Modificações Pós-Translacionais associadas ao Envelhecimento
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JoVE 신문 생화학
Isolation of Intermediate Filament Proteins from Multiple Mouse Tissues to Study Aging-associated Post-translational Modifications

Isolamento de Proteínas de Filamento Intermediário a partir de Tecidos Múltiplos de Rato para Estudar Modificações Pós-Translacionais associadas ao Envelhecimento

DOI:
10.3791/55655-v

•

09:29 min

•

May 18, 2017

•

, , , ,
1Department of Cell Biology and Physiology, School of Medicine,University of North Carolina at Chapel Hill

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:49Preparation of Detergent-soluble and High-salt Extracts of Tissue-specific IFs
  • 03:16Automated Tissue Lysis for RNA and IF Protein Extraction in High-volume Experiments
  • 07:15Results: High-salt Extraction of Intermediate Filament Proteins Using Lysing Matrix
  • 08:50Conclusion

Summary

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Neste método, apresentamos procedimentos bioquímicos para isolamento rápido e eficiente de proteínas de filamento intermediário (IF) a partir de tecidos de múltiplos ratos. IFs isoladas podem ser usadas para estudar mudanças em modificações pós-translacionais por espectrometria de massa e outros ensaios bioquímicos.

Tags

Intermediate Filament ProteinsPost-translational ModificationsTriton X-100 BufferHigh Salt BufferPBS EDTA BufferSDS Sample BufferCentrifugationHomogenization

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