Aislamiento de linfocitos T humanos, cultura y análisis de la migración In Vitro</em

La migración de los linfocitos T implica la interacción adhesiva de las integrinas de la superficie celular con ligandos expresados ​​en otras células o con proteínas de la matriz extracelular. La activación precisa espacio-temporal de las integrinas de un estado de baja afinidad a un estado de alta afinidad en el borde de la célula principal es importante para la migración de los linfocitos T¹. Del mismo modo, la retracción del borde de la célula de seguimiento o uropod, es un paso necesario en el mantenimiento persistente de la integrina dependientes de la motilidad de linfocitos T². Muchos enfoques terapéuticos para las integrinas enfermedades autoinmunes o inflamatorias objetivo como un medio para inhibir la contratación excesiva y la migración de los leucocitos³. Para estudiar los eventos moleculares que regulan la migración de linfocitos T humanos, hemos utilizado un<em> In vitro</em> Sistema para analizar la migración de células sobre un sustrato de dos dimensiones que simula el medio ambiente que un linfocito T se encuentra en la contratación de la vasculatura. Los linfocitos T son los primeros aislados de donantes humanos y luego se estimula y se cultivan durante siete a diez días. Durante el ensayo, los linfocitos T se permite que se adhieran y migrar en un sustrato recubierto con una molécula de adhesión intercelular-1 (ICAM-1), un ligando de la integrina LFA-1, y derivado de células estromales factor-1 (SDF-1). Nuestros datos muestran que los linfocitos T presentan una velocidad migratoria de unos 15 m / min. La migración de los linfocitos T pueden ser inhibidas por bloqueo de la integrina¹ O por los inhibidores de la maquinaria celular que regula la actomiosina la migración celular².