Human T-lymfocyt Isolatie, Cultuur en Analyse van de migratie In Vitro</em

De migratie van T-lymfocyten houdt de lijm interactie van het celoppervlak integrines met liganden uitgedrukt op andere cellen of met extracellulaire matrix eiwitten. De precieze spatiotemporele activering van integrines van een lage affiniteit staat om een ​​hoge affiniteit toestand bij de cel leading edge is belangrijk voor de T-lymfocyt migratie¹. Ook terugtrekken van de cel achterrand of uropod, is een noodzakelijke stap in het onderhouden van aanhoudende integrine-afhankelijke T-lymfocyt motiliteit². Vele therapeutische benaderingen van auto-immuunziekten of ontstekingsziekten doel integrines als een middel om het buitensporige werving en migratie van leukocyten remmen³. De studie van de moleculaire gebeurtenissen die de menselijke T-lymfocyten migratie te reguleren, hebben we gebruik gemaakt een<em> In vitro</em> Systeem naar cel migratie te analyseren op een twee-dimensionale substraat dat de omgeving die een T-lymfocyt tegenkomt bij de werving van het vaatstelsel nabootst. T-lymfocyten worden eerst geïsoleerd uit menselijke donoren en worden vervolgens gestimuleerd en gekweekt voor zeven tot tien dagen. Tijdens de test, zijn T-lymfocyten mogen hechten en migreren op een substraat bekleed met intercellulaire adhesie molecule-1 (ICAM-1), een ligand voor integrine LFA-1, en stromale cel-afgeleide factor-1 (SDF-1). Onze gegevens tonen aan dat T-lymfocyten een trekkende snelheid van ~ 15 micrometer / min vertonen. T-lymfocyt migratie kan worden geremd door integrine blokkade¹ Of door remmers van de cellulaire actomyosin machines die regelt celmigratie².