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タンパク質リン酸化の定量のための最適化された1分子プルダウンアッセイ

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Biochemistry

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An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation

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タンパク質リン酸化の定量のための最適化された1分子プルダウンアッセイ

DOI:

10.3791/63665-v

•

07:45 min

•

June 06, 2022

•

Elizabeth M. Bailey, Emanuel Salazar-Cavazos, Rachel M. Grattan, Michael J. Wester, David J. Schodt, Julian A. Rojo, Keith A. Lidke³, Diane S. Lidke³

¹Department of Pathology,University of New Mexico School of Medicine, ²Department of Physics and Astronomy,University of New Mexico, ³Comprehensive Cancer Center,University of New Mexico Health Sciences Center

Chapters

00:04Introduction
00:53Coverslip Preparation
03:18Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
04:09SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
04:40Image Acquisition
05:45Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
07:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

本プロトコルは、改良された一分子プルダウン(SiMPull)アッセイを用いてタンパク質リン酸化を定量するためのサンプル調製およびデータ分析について記載する。

Tags

AI-powered Protein Phosphorylation Quantification Single-molecule Pull-down Assay SiMPull Protocol Antibody Labeling Autofluorescence Reduction Single-molecule Analysis Phosphorylation Status Of Individual Proteins Alternative To Western Blotting And Mass Spectrometry

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