Journal
/
Biochemistry
/
Измерение связывания нуклеотидов с интактными функциональными мембранными белками в режиме реального времени
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Измерение связывания нуклеотидов с интактными функциональными мембранными белками в режиме реального времени

DOI:
10.3791/61401-v

•

08:33 min

•

March 11, 2021

•

, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

В этом протоколе представлен метод измерения связывания адениновых нуклеотидов с рецепторами в режиме реального времени в клеточной среде. Связывание измеряется как резонансный перенос энергии Фёрстера (FRET) между производными тринитрофенилнуклеотидов и белком, меченным неканонической флуоресцентной аминокислотой.

Tags

Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Используя строительные леса, липосом Развести липидами проксимальный белок-белковых взаимодействий<em> In Vitro</em

Метод визуализации и анализа Мембранные белков, взаимодействующих с помощью просвечивающей электронной микроскопии

Измерение сигнальной связи рецептора с G-белком с помощью радиомаркированного связывания GTP

Измерение связывания белка с F-актином путем совместного осаждения

Измерения биомолекулярных DSC профили с термолабильных лигандами быстро характеризовать складывания и привязки взаимодействия

Диссипативных Microgravimetry для изучения динамики привязки фосфолипидного связывая протеин Annexin A2 в твердой поддержке липидов бислоев с помощью кварцевого резонатора

Захват и идентификации RNA-связывая протеинов с помощью щелчка при содействии химия РНК interactome захвата (ЦАРСКОЕ) стратегии

Люминесцентные серебряные пятная белков в полиакриламидных гелей

Мониторинг GPCR-я-arrestin1/2 Взаимодействия в режиме реального времени живых систем для ускорения обнаружения наркотиков

Pepti'uick, одноступенчатая инкорпорация мембранных белков в биотинилатированные пептидиски для оптимизированных белковых связывающих анализов

Read Article