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Misurare il legame nucleotidico a proteine di membrana intatte e funzionali in tempo reale
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Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
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Misurare il legame nucleotidico a proteine di membrana intatte e funzionali in tempo reale

italiano

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08:33 min

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March 11, 2021

DOI:

10.3791/61401-v

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10.3791/61401-v

•

08:33 min
March 11, 2021

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, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Summary

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Questo protocollo presenta un metodo per misurare il legame dei nucleotidi adenina ai recettori in tempo reale in un ambiente cellulare. Il legame è misurato come trasferimento di energia di risonanza di Förster (FRET) tra derivati del nucleotide trinitrofenile e proteine marcate con un amminoacido fluorescente non canonico.

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Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

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Usher, S. G., Ashcroft, F. M., Puljung, M. C. Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time. J. Vis. Exp. (169), e61401, doi:10.3791/61401 (2021).

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