Journal
/
Biochemistry
/
Måling av nukleotidbinding til intakte, funksjonelle membranproteiner i sanntid
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time

Måling av nukleotidbinding til intakte, funksjonelle membranproteiner i sanntid

DOI:
10.3791/61401-v

•

08:33 min

•

March 11, 2021

•

, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokollen presenterer en metode for måling av adeninnukleotidbinding til reseptorer i sanntid i et cellulært miljø. Binding måles som Förster resonans energioverføring (FRET) mellom trinitrofenylnukleotidderivater og protein merket med en ikke-kanonisk, fluorescerende aminosyre.

Tags

Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Bruke Stillas liposomer for å rekonstituere Lipid-proksimale Protein-protein interaksjoner<em> In Vitro</em

Metode for å visualisere og analysere Membran samspill proteiner av transmisjonselektronmikroskopi

Måling av G-proteinkoblet reseptor-signalering via radiomerket GTP-binding

Måling av proteinbinding til F-aktin ved co-sedimentering

Måle Biomolecular DSC profiler med Thermolabile ligander å raskt karakterisere Folding og bindende interaksjoner

Dissipative Microgravimetry å studere Binding dynamikken i Phospholipid bindende Protein Annexin A2 til Solid-støttet Lipid Bilayers bruker et Quartz-Resonator

Fangst og identifikasjon av RNA-bindende proteiner ved hjelp av Klikk kjemi-assistert RNA-interactome Capture (CARIC) strategi

Fluorescerende sølv farging av proteiner i polyakrylamid Gels

Overvåking GPCR-β-arrestin1/2 interaksjoner i Real time levende systemer for å akselerere Drug Discovery

PeptiQuick, en ett-trinns innlemmelse av membran proteiner i Biotinylated Peptidiscs for strømlinjeformet protein bindende analyser

Read Article