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वास्तविक समय में बरकरार, कार्यात्मक झिल्ली प्रोटीन के लिए न्यूक्लियोटाइड बाइंडिंग को मापना
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
DOI:

08:33 min

March 11, 2021

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

यह प्रोटोकॉल सेलुलर वातावरण में वास्तविक समय में रिसेप्टर्स के लिए एडेनिन न्यूक्लियोटाइड बाइंडिंग को मापने के लिए एक विधि प्रस्तुत करता है। बाइंडिंग को ट्राइनिट्रोफेनिल न्यूक्लियोटाइड डेरिवेटिव और प्रोटीन के बीच एक गैर-कैननिकल, फ्लोरोसेंट अमीनो एसिड के साथ लेबल किए गए फॉस्टर अनुनाद ऊर्जा हस्तांतरण (फ्रेट) के रूप में मापा जाता है।

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