/
/
Сочетая Неуменьшающие СДС-СТРАНИЧНЫЙ анализ и химические перекрестные ссылки для обнаружения Мультимерных комплексов, стабилизированных дисульфидными связями в клетках млекопитающих в культуре
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:34Harvesting Cells After Blocking Free Cysteine Residues Using Iodoacetamide
- 02:02Extraction of Protein and Sample Preparation
- 03:13In Vivo Formaldehyde Cross-linking of Endogenous Proteins in U-2 OS Cells
- 04:30Fractionation of Nuclei
- 06:11Extraction of Protein and Sample Preparation
- 06:51SDS-PAGE Analysis
- 07:53Results: Analyzing Multimeric Complexes Using a Two-step Method of Non-reducing SDS-PAGE Analysis and Formaldehyde Cross-linking
- 09:04Conclusion
Соединений дисульфида длиной были знаны, что стабилизировали структуру много протеинов. Простой метод анализа мультимерных комплексов, стабилизированных этими связями, заключается в неуменьшении анализа СДС-СТРАНИЧКА. Здесь, этот метод проиллюстрирован путем анализировать ядерную изоформу dUTPase от людской косточки остеосаркомы клетки линии U-2 OS.
