Journal
/
/
الجمع بين تحليل الصفحات غير المتناقصة والربط الكيميائي للكشف عن مجمعات مولتيميرك التي استقرت بالروابط الثنائية في خلايا الثدييات في الثقافة
JoVE Journal
Developmental Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Developmental Biology
Combining Non-reducing SDS-PAGE Analysis and Chemical Crosslinking to Detect Multimeric Complexes Stabilized by Disulfide Linkages in Mammalian Cells in Culture
DOI:

09:37 min

May 02, 2019

,

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Harvesting Cells After Blocking Free Cysteine Residues Using Iodoacetamide
  • 02:02Extraction of Protein and Sample Preparation
  • 03:13In Vivo Formaldehyde Cross-linking of Endogenous Proteins in U-2 OS Cells
  • 04:30Fractionation of Nuclei
  • 06:11Extraction of Protein and Sample Preparation
  • 06:51SDS-PAGE Analysis
  • 07:53Results: Analyzing Multimeric Complexes Using a Two-step Method of Non-reducing SDS-PAGE Analysis and Formaldehyde Cross-linking
  • 09:04Conclusion

Summary

Automatic Translation

ومنذ فتره طويلة من المعروف ان الروابط الثنائية الكبريتيد لتحقيق الاستقرار في هيكل العديد من البروتينات. والطريقة البسيطة لتحليل المجمعات التي استقرت فيها هذه الروابط هي من خلال عدم الحد من البيانات التحليلية للصفحات. هنا ، يتم توضيح هذه الطريقة عن طريق تحليل ايزوفورم النووية من دوبيز من العظم البشري خط الخلايا العظمية U-2 OS.

Related Videos

Read Article